[发明专利]一种基质表达T.fusca角质酶的方法有效
申请号: | 201210241426.7 | 申请日: | 2012-07-05 |
公开(公告)号: | CN102899298A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 吴敬;宿玲恰;陈晟;陈坚 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种基质表达T.fusca角质酶的方法,属于生物工程技术和酶工程领域。本发明由本研究室前期构建的Tfu_0883/pET-20b(+)为模板,PCR扩增得到角质酶成熟蛋白基因,连接表达载体,转化E.coli宿主菌,实现了角质酶的基质表达。摇瓶发酵中,经过诱导重组角质酶在培养基中的酶活达到204.8U/mL,为总酶活的95.3%。进一步在3L发酵罐中放大培养,最终酶活为1063U/mL,是摇瓶发酵的5.2倍,生产强度为44.2U/mL/h,为国内外报道的最高水平。 | ||
搜索关键词: | 一种 基质 表达 fusca 角质 方法 | ||
【主权项】:
一种基质表达T.fusca角质酶的方法,其特征在于,将NCBI编号为AAZ54921的T.fusca角质酶成熟蛋白基因在大肠杆菌中表达,发酵培养并收集发酵上清液。
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