[发明专利]一种快速高效测定葡萄酒中酚酸的方法

摘要

一种快速高效测定葡萄酒中13种酚酸的方法，属于葡萄酒风味物质分析技术领域。本发明利用超高效液相色谱，对葡萄酒中的酚酸物质进行定性和定量分析：选取BEHC18色谱柱，流动相为2%乙酸水和甲醇，流速设定为0.3mL/min，紫外检测波长龙胆酸为320nm，其余均为280nm，柱温50℃，进样量为1μL，以峰面积外标法定量，可以在10min内同时对葡萄酒中13种酚酸进行检测分析。本发明无需进行任何样品前处理，避免因前处理导致的损失；与传统HPLC相比，本发明可同时检测出更多的酚酸类化合物，并且分离效果好，分析过程大大缩短，方便易操作，极大的提高了检测效率及节省流动相成本。本发明为进一步系统研究葡萄酒中的风味物质，提高葡萄酒品质有重要意义。

主权项

一种快速高效测定葡萄酒中酚酸的方法，其特征在于利用超高效液相色谱UPLC和二极管阵列检测器同时对葡萄酒中13种酚酸进行定性和定量分析：所述检测13种酚酸，分别为：没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、香草酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、鞣花酸、水杨酸；（1）标准溶液配置：分别精确称取所述13种酚酸各10.0‑15.0mg，用甲醇溶解并转移至10 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，封口，作为标准贮备液，在‑20℃保存备用；使用前，根据实验需要将此标准贮备液用甲醇稀释至适宜含量，以配制标准工作液和混合标准工作液；（2）葡萄酒样品经过0.45µm滤膜过滤，用于进行检测分析；（3）超高效液相色谱分离检测条件：色谱柱：美国Bridge Ethylene Hybrid (BEH) C18色谱柱或同类UPLC C18色谱柱流动相A：乙酸:水为2:98，v/v，即2%乙酸水；流动相B：甲醇；流速：0.3 mL/min；洗脱程序：0‑3.2 min，A为92％‑80％，B为8％‑20％；3.2‑8 min，A为80％‑56％，B为20％‑44％；8‑8.2 min，A为56％‑92％，B为44％‑8％；8.2‑10 min，A为92％，B为8％；检测波长：龙胆酸为320 nm，其余均为280 nm；柱温50℃，进样量为1 μL，以峰面积外标法定量；紫外检测器的选择：选用二极管阵列检测器；（4）定性：对13种酚酸混合标准品进行色谱检测，得到13种酚酸标准品色谱图；对葡萄酒样品进行色谱检测，得到葡萄酒样品中13种酚酸的UPLC色谱图；通过增高法进行定性分折；（5）定量制作标准曲线：准确配制0.2‑211.2 mg/L的五个不同浓度的13种酚酸的混合标样，按照上述液谱条件进样，进样量为1μL；以峰面积Y为纵坐标，质量浓度X为横坐标，计算得到13条标准曲线；定量：每种待测物质分别对应于外标做标准曲线，经过UPLC检测后将峰面积代入相对应的标准曲线方程计算出待测物质的含量。