[发明专利]一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法

摘要

本发明公开了利用混合藻类构建人工藻结皮的方法，通过在沙漠选择充分发育的藻结皮，采集，风干后研磨，将裸沙过0.2mm筛后按照每升BG11液体培养基加入100g裸沙中，接种量是50g干土/升培养基，在室温，光照强度4000lux，3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集；培养的混合藻，优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻占总生物量的80％；颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等物种占总生物量的20％；将收集的藻种风干后研磨成藻粉置于冰箱内-20℃；在土壤为20℃在裸沙上接种，接种量是80g·m-2，每天施加水分3L·m-2。本发明成功地避开了藻类的纯化分离问题，具有广泛的应用性。

主权项

一种利用混合藻类构建人工藻结皮的方法，其特征在于，其具体方法包括以下步骤：(1)在沙漠选择充分发育的藻结皮，采集，风干后研磨，然后将土样收集；土样中所含藻类以具鞘微鞘藻、鞘丝藻、席藻、颤藻、念珠藻、单歧藻、伪枝藻丝状蓝藻为主体，其中具鞘微鞘藻是优势物种，还有以土生绿球藻、小球藻、色球藻等球形藻类常见物种；(2)在培养盘中接入配制好的BG11液体培养基，将裸沙过0.2mm筛后按照每升培养基加入100g裸沙加入BG11液体培养基中，加入裸沙将培养盘底铺满，置于培养架上；然后将上述步骤(1)的研磨结皮土样加入液体培养基进行培养，接种量是50g干土/升培养基，培养温度是室温，光照强度80μE·m‑2·s‑1，3周后将藻种和所固着的沙粒一并收集；经镜检，其培养的混合藻类中，优势物种是以微鞘藻、鞘丝藻、席藻为主的丝状藻占总生物量的80％；除此以外，还有颤藻、土生绿球藻、小球藻、衣藻、舟形藻和菱板藻等属的一些物种占总生物量的20％；(3)将收集的藻种自然风干后，利用手动石磨低速研磨成藻粉，藻粉装入封口塑料袋，置于冰箱内‑20℃保存；(4)在土壤温度为20℃时即可接种，利用上述步骤(3)培养后收集的混合藻种在裸沙上接种，接种量是80g·m‑2，在前15天内每天施加水分，施水量是3L·m‑2，一个月内可初步形成藻结皮，3个月内形成稳定的藻结皮；(5)本发明中，每升BG11培养基组分如下为，NaNO3 1.5g，，K2HPO4 0.04g，MgSO4·7H2O 0.07g，CaCl2·2H2O 0.036g，柠檬酸0.006g，柠檬酸铁胺0.006g， 乙二胺四乙酸钠盐0.001g，CaCO3 0.02g，微量元素A5溶液1mL；其中，A5溶液组分为每升重蒸水中加入H3BO3 2.86g，MnCl2·4H2O 1.86g，ZnSO4·7H2O 0.22g，Na2MoO4·2H2O 0.39g，CuSO4·5H2O 0.08g，Co(NO3)2·6H2O 0.05g。