[发明专利]黑鲷抗菌肽表达载体与构建方法及表达产物与制备方法

摘要

黑鲷抗菌肽表达载体与构建方法及表达产物与制备方法，涉及鱼类基因工程。根据获得的黑鲷抗菌肽AS-hepc2 cDNA序列，用pET28a+原核表达载体，在大肠杆菌中诱导表达AS-hepc2前体肽融合蛋白得可溶性表达产物，经亲和层析纯化后得目的蛋白，用以测定抗菌活性。构建的BL21(DE3)(pET28a/AS-hepc2)表达产物无需经过P3C蛋白酶切割标签，只需通过一次亲和纯化即可获蛋白纯品，简化操作步骤，降低操作成本，快速获得可溶性纯品蛋白。构建的BL21(DE3)(pET28a/AS-hepc2)表达体系再诱导表达5h，经镍亲和纯化后获得的蛋白纯品量可为二者的10～50倍，表达效率高。

主权项

黑鲷抗菌肽AS‑hepc2的基因序列为：ggctcattca ctgaggtgca agagccggag gagccaatga acaatgagag tccagttgct     60gcacatgaag agaagtcaga ggagtcctgg aagatgccgt ataacaacag acacaagcgc    120agccccgctg gttgtcgctt ttgctgcggt tgctgtccta acatgagagg atgtggtgtc    180tgctgcaggttc                                                         192。