[发明专利]一种去除细菌荚膜多糖中内毒素的方法无效
申请号: | 201110365650.2 | 申请日: | 2011-11-17 |
公开(公告)号: | CN102504042A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 吴强;张丽莺;李靖;罗力心;魏新;赵丹;韩炼;陈庚;关晓峰;王子龙 | 申请(专利权)人: | 成都欧林生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K39/02;A61K39/102;A61P31/04 |
代理公司: | 成都金英专利代理事务所(普通合伙) 51218 | 代理人: | 袁英 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种去除细菌荚膜多糖中内毒素的方法,它包括以下步骤:(1)在细菌荚膜多糖溶液中加入浓度为8~12%v/v的TritonX-114,直到终浓度为0.8~1.2%v/v;(2)混合后置于50~60℃下5~15分钟;(3)溶液分层后,在转速为3000~5000转/分的装置内离心,收集上清液,完成一次萃取;(4)用凝胶法检测上清液中内毒素含量,重复萃取,直至内毒素含量小于50EU/μg;(5)透析去除残余的TritonX-114。本发明提供一种去除细菌荚膜多糖中内毒素的方法,采用TritonX-114,具有萃取后细菌荚膜多糖中内毒素含量下降90%,荚膜多糖回收率在85%以上等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 去除 细菌 荚膜 多糖 内毒素 方法 | ||
【主权项】:
一种去除细菌荚膜多糖中内毒素的方法,其特征在于:它包括以下步骤:(1)在细菌荚膜多糖溶液中逐渐加入浓度为8~12%v/v的TritonX‑114,直到混合溶液的终浓度为0.8~1.2%v/v,搅拌混合25~35分钟;(2)搅拌混合均匀后,置于50~60℃条件下,5~15分钟后观察分层情况;(3)待溶液分层后,置于自动离心装置内进行自动离心,自动离心装置的转速为3000~5000转/分,离心时间为8~12分钟,离心完成后收集上清液,完成一次萃取;(4)用凝胶法检测(3)中所得上清液中内毒素含量,重复以上萃取步骤,直至内毒素含量小于50 EU/μg;(5)用无热原的注射用水透析(4)中所得上清液,透析时间20~28小时,透析去除残余的TritonX‑114。
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