[发明专利]巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因及其重组质粒的构建及酶的纯化方法有效
申请号: | 201110350812.5 | 申请日: | 2011-11-09 |
公开(公告)号: | CN102399796A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
发明(设计)人: | 李迅;王婷;王亮亮 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N15/63;C12N15/66;C12N9/02;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因及其重组质粒的构建及酶的纯化方法,该基因的核苷酸序列cypI如SEQIDNO.1所述。通过对大肠杆菌表达载体的选择和基因的定向改造,选择的pTrc99A载体使重组蛋白的表达量大为增加,比选用的pET20b载体的重组蛋白表达量增加了3.8倍,酶活达到770U/mL。将改造后的编码巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因cypI插入pTrc99A,并转化大肠杆菌,其在大肠杆菌中表达的酶活较原始基因cyp提高了32%,酶活达到1020U/mL(图-2)。 | ||
搜索关键词: | 巨大 芽孢 杆菌 ala2 细胞 色素 p450 基因 及其 重组 质粒 构建 纯化 方法 | ||
【主权项】:
巨大芽孢杆菌ALA2细胞色素P450酶基因,其特征在于该基因的核苷酸序列cypI如SEQ ID NO.1所述。
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