[发明专利]检测组织或细胞中可溶性表氧化物水解酶活性的试剂有效
申请号: | 201110330608.7 | 申请日: | 2011-10-26 |
公开(公告)号: | CN102608081A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 朱毅;刘燕;何金龙;李楠 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京市汉信律师事务所 11373 | 代理人: | 王文生 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 一种检测组织或细胞中可溶性表氧化物水解酶活性的试剂,由裂解液、检测缓冲溶液、检测底物溶液和sEH抑制剂溶液组成。本发明还提供了制备上述试剂的方法。 | ||
搜索关键词: | 检测 组织 细胞 可溶性 氧化物 水解 活性 试剂 | ||
【主权项】:
一种检测组织或细胞中可溶性表氧化物水解酶活性的试剂,由裂解液、检测缓冲溶液、检测底物溶液和sEH抑制剂溶液组成;通过下述方法制备得到:裂解液包括低渗溶液和苯甲基磺酰氟溶液,其中:低渗溶液为去离子水,或按如下配制:将三羟甲基氨基甲烷55‑65毫克、氯化镁15‑25毫克、乙二醇二乙醚二胺四乙酸35‑40毫克、乙二胺四乙酸3‑5毫克溶解于水中,调节pH至7.0‑7.5,水定容至100ml;苯甲基磺酰氟溶液:将苯甲基磺酰氟溶于异丙醇中,浓度为100mM;苯甲基磺酰氟溶液与低渗溶液的体积比为1/1000~1/100;检测缓冲溶液:将三羟甲基氨基甲烷溶解至水中,浓度为50mM,调节pH至6.8‑7.3,加入牛血清白蛋白溶解,牛血清白蛋白的加入量为0.1‑0.3mg/ml;检测底物溶液:将Epoxy Fluor 7溶解至二甲基亚砜中配成5mM的溶液;sEH抑制剂溶液:将sEH抑制剂溶解至二甲基亚砜中,配成10mM的溶液。
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