[发明专利]一种用磁性微粒从含微量核酸的样本中纯化DNA的方法有效
申请号: | 201110314908.6 | 申请日: | 2011-10-17 |
公开(公告)号: | CN102352351A | 公开(公告)日: | 2012-02-15 |
发明(设计)人: | 崔亚丽;邓晨;杨柳;张景阁;赵稳操;李芳 | 申请(专利权)人: | 西安金磁纳米生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 西安智邦专利商标代理有限公司 61211 | 代理人: | 徐平 |
地址: | 710077 陕西省西安市高新区丈*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明提供一种利用磁性纳米复合材料简便、快速、有效地从法医样本等含微量核酸的样本中纯化DNA的方法。该方法包括以下步骤:(1)取待纯化样品,加入终浓度分别为3~6M的胍盐裂解液和0.01~0.05M的二硫苏糖醇,混匀后于水浴中充分裂解5~30min;(2)形成含磁性微粒-DNA复合物的混合溶液;(3)将磁性微粒-DNA复合物从混合溶液中分离;(4)清洗;(5)洗脱获得纯化的DNA。本发明可满足从法医样本中提取高质量的DNA,并应用于下游PCR扩增、STR分型等应用;该方法无需离心,操作步骤快速、简便。根据本发明,还可制作出既适用于手动操作又可配套自动化仪器从而纯化得到法医样本DNA的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 一种 磁性 微粒 微量 核酸 样本 纯化 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种用磁性微粒从含微量核酸的样本中纯化DNA的方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:(1)裂解样品取待纯化样品,加入终浓度分别为3~6M的胍盐裂解液和0.01~0.05M的二硫苏糖醇,混匀后于水浴中充分裂解5~30min;(2)形成含磁性微粒 DNA复合物的混合溶液取200~600μg磁性微粒加入步骤(1)得到的裂解后的溶液中,振荡混匀,于室温充分结合,形成含磁性微粒 DNA复合物的混合溶液;(3)将磁性微粒 DNA复合物从混合溶液中分离对混合溶液磁性分离,弃去上清,将磁性微粒 DNA复合物从混合溶液中分离出来,收集;(4)清洗清洗收集到的磁性微粒 DNA复合物,去除抑制下游应用的杂质;(5)洗脱将洗脱液与清洗后的磁性微粒 DNA复合物混合均匀,使DNA从磁性微粒上洗脱下来,在外加磁场作用下将磁性微粒和洗脱下来的DNA分离,收集上清,即为纯化的DNA。
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