[发明专利]水稻细胞转化方法有效
申请号: | 201110303114.X | 申请日: | 2011-10-09 |
公开(公告)号: | CN102337293A | 公开(公告)日: | 2012-02-01 |
发明(设计)人: | 李浩;段永波;翟晨光;章旺根 | 申请(专利权)人: | 安徽省农业科学院水稻研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N5/10;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉;罗天乐 |
地址: | 230031 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供一种利用PMI选择标记高效率地将外源基因导入水稻细胞的方法、所用的转化系统、以及利用该方法制备转基因水稻的方法。 | ||
搜索关键词: | 水稻 细胞 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种将外源基因导入水稻皖粳97品种的细胞的方法,包括下述步骤:(1)将成熟水稻谷粒去壳、灭菌后将胚分离出来;(2)取步骤(1)所得的分离的胚置于愈伤组织诱导培养基上在30℃暗培养2周以产生次生愈伤组织;(3)将步骤(2)中获得的愈伤组织与携带外源基因和磷酸甘露糖异构酶(PMI)标记基因的农杆菌接触20分钟;(4)将步骤(3)的愈伤组织转移到共培养基上,23℃培养48小时;(5)将步骤(4)的愈伤组织置于恢复培养基上培养5天;(6)将步骤(5)的愈伤组织转移到含有蔗糖和甘露糖的选择培养基上,在30℃暗培养3周以获得出芽的愈伤组织;和(7)将出芽的愈伤组织转移到再生培养基中继续培养。
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