[发明专利]一种用LC-MS仪检测地沟油的方法

摘要

本发明涉及地沟油检测技术领域，特别是涉及一种用LC-MS仪检测地沟油的方法；包括乙酸铵溶液配置、DBS标准储备溶液的配置、DBS标准系列溶液的配置、样品处理、LC-MS色谱条件的构建、样品测定和结果判断等步骤，本发明以DBS为鉴别地沟油的特异性指标，利用LC-MS仪为主要检测工具，通过反复试验构建出完整的检测条件，本发明能快速、精确地检测鉴别出样品是否是地沟油，检出限为20μg/ml，弥补了现行国家标准缺陷。

主权项

一种用LC‑MS仪检测地沟油的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤A、标准溶液的配置：(1)、乙酸铵溶液：称取乙酸铵加水溶解，摇匀配制成质量浓度为0.6～0.8mg/ml的乙酸铵溶液；(2)、DBS标准储备溶液：取DBS加乙醇稀释，摇匀配制成质量浓度为0.5～2mg/m l的DBS标准储备溶液；(3)、DBS标准系列溶液：分别取DBS标准储备液加乙醇稀释，制得质量浓度分别为4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml的DBS标准系列溶液；在所构建的色谱条件下，分别精密量取10μl注入LC‑MS仪，记录色谱图，以DBS浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；步骤B、样品处理：先取样品10.0ml，加入乙醇10～20ml，80～100℃水浴加热5～10min，涡旋混合3～5min，5000～10000r/min离心5～10min，弃去油层，旋转蒸发至干；再加甲醇‑2％乙酸的水溶液3～5ml复溶，5000～10000r/min离心5～10min，取上清液加入到已活化的固相萃取柱，接着用正己烷3～5ml淋洗，弃去淋洗液，最后用体积比为98∶2的甲醇‑乙酸铵溶液3～5ml洗脱，洗脱液用0.45μm滤膜滤过，收集滤液，得到待测样品；步骤C、LC‑MS色谱条件的构建：(1)、色谱条件：色谱柱：C18柱(2.0mm×50mm×2.2μm)流动相：甲醇‑乙酸铵混合溶液，所述甲醇和乙酸铵的体积比为75～85∶15～25流速：0.2ml/min柱温：30～40℃；(2)、质谱条件：离子化模式：电喷雾电离源负离子模式(ESI‑)雾化气流速1.5L/min检测器电压：1.68kvCDL温度：200℃加热模块温度：200℃选择监测离子：m/z＝297.15、311.17、325.18、339.20；步骤D、样品测定和结果判断：在构建的条件下，精密量取待测样品10μl，注入LC‑MS仪，如检出的色谱峰保留时间与高纯度DBS一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，有所选择检测的离子出现，且相对丰度比也与高纯度DBS一致，则可判断样品中存在DBS，进而判断样品为地沟油。