[发明专利]一种用LC-MS仪检测地沟油的方法

说明书

技术领域

本发明涉及地沟油检测技术领域，特别是涉及一种用LC-MS仪检测地沟油的方法。

背景技术

地沟油，是不法分子将下水道中的油腻漂浮物或者将宾馆、酒楼的剩饭、剩菜(通称泔水)回收，经过过滤、加热、沉淀、分离、脱色、洗油等工序加工、提炼出的油，其主要成分仍然是甘油三酯，这种被称作地沟油的三无产品，不仅质量极差、极不卫生，而且也比真正的食用油多了许多致病、致癌的毒性物质。一旦食用地沟油，它会破坏人们的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。所以地沟油是严禁用于食用油领域的。但是，也确有一些不法商贩受利益驱动而不顾人民群众生命安全私自生产加工地沟油并作为食用油低价销售给一些小餐馆，给人们的身心都带来极大伤害。

购买普通食用油时，一般的消费者会被建议要学会感官鉴别。根据经验，食用植物油一般通过看、闻、尝、听、问五个方面来进行鉴别。但是对于对于掺杂有有害物质的劣质地沟油，仅仅靠人为的看、闻、尝、听的感官来进行鉴别是十分困难的。

目前，国内尚未制定地沟油鉴别检测的国家标准方法，虽然国内外研究人员进行了一些探索，鉴别油脂优劣的常规指标一般是水分、含量、比重、折光率、皂化值、酸价、氧化值、过氧化值、羰基值、碘值、挥发性组分、动物油脂、醛和酮类化合物(合格食用油所不含的)、电导率等指标。但是对地沟油检测的研究报道并不多见，其主要原因是高酸值的地沟油成分比较复杂，其检测的特异性理化指标还处于实验研讨阶段，要准确定性定量目前仍比较困难。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的之一在于提供了一种用LC-MS仪检测地沟油的方法；

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种用LC-MS仪检测地沟油的方法，包括如下步骤：

步骤A、标准溶液的配置：

(1)、乙酸铵溶液：称取乙酸铵加水溶解，摇匀即得质量浓度为0.6～0.8mg/ml的乙酸铵溶液；

(2)、DBS(十二烷基苯磺酸钠的简称，以下同)标准储备溶液：取DBS加乙醇稀释，摇匀即得质量浓度为0.5～2mg/ml的DBS标准储备溶液；

(3)、DBS标准系列溶液：分别取DBS标准储备液加乙醇稀释，制得质量浓度分别为4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml的DBS标准系列溶液；在所构建的色谱条件下，分别精密量取10μl注入LC-MS仪，记录色谱图，以DBS浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；

步骤B、样品处理：

先取样品10.0ml，加入乙醇10～20ml，80～100℃水浴加热5～10min，涡旋混合3～5min，5000～10000r/min离心5～10min，弃去油层，旋转蒸发至干；再加甲醇-2％乙酸的水溶液3～5ml复溶，5000～10000r/min离心5～10min，取上清液加入到已活化的固相萃取柱，接着用正己烷3～5ml淋洗，弃去淋洗液，最后用体积比为98∶2的甲醇-乙酸铵溶液3～5ml洗脱，洗脱液用0.45μm滤膜滤过，收集滤液，得到待测样品；

步骤C、LC-MS色谱条件的构建：

(1)、色谱条件：

色谱柱：C₁₈柱(2.0mm×50mm×2.2μm)

流动相：甲醇-乙酸铵混合溶液，所述甲醇和乙酸铵的体积比为75～85∶15～25

流速：0.2ml/min

柱温：30～40℃；

(2)、质谱条件：

离子化模式：电喷雾电离源负离子模式(ESI^-)

雾化气流速1.5L/min

检测器电压：1.68kv

CDL温度：200℃

加热模块温度：200℃

选择监测离子：m/z＝297.15、311.17、325.18、339.20；

步骤D、样品测定和结果判断：

在构建的条件下，精密量取待测样品10μl，注入LC-MS仪，如检出的色谱峰保留时间与高纯度DBS一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，有所选择检测的离子出现，且相对丰度比也与高纯度DBS一致，则可判断样品中存在DBS，进而判断样品为地沟油。

根据检测数据进行定量计算：

式中：ω(十二烷基苯磺酸钠)-样品中十二烷基苯磺酸钠质量分数，μg/ml，