[发明专利]一种鲟科鱼类卵子的筛选方法

摘要

本发明涉及一种鲟科鱼类卵子的筛选方法。要解决现有的鱼类卵子质量的检测方法中缺少综合评价，导致评价方法存在偏差的问题。方法：一、从鲟科鱼类体内取出卵子；二、制备卵提取液；三、血清的制备；四、体液的制备；五、测定卵母细胞的极化指数；六、测定血清卵黄蛋白原浓度；七、测定Fe离子的含量、卵Zn离子的含量、卵VE的含量和卵谷草转氨酶的含量；八、测定ACP的含量和AKP的含量；九、测定的各项指标同时满足目标值，即表明同一卵巢内的其他卵子已达到成熟，即完成鲟科鱼类卵子的筛选。本发明方法使鲟鱼的受精率达85％以上，孵化率达到95％，鱼苗的成活率达到90％。用于鲟科鱼类的繁殖。

主权项

一种鲟科鱼类卵子的筛选方法，其特征在于鲟科鱼类卵子的筛选方法，按以下步骤进行：一、从鲟科鱼类体内取出卵子；二、制备卵提取液：将步骤一取出的卵子剪碎，取鲜重5g，加入12～17mL浓度为0.02～0.05mol/L、pH为7.2～8.0的Tris‑HCl缓冲液，在0～4℃研磨，得到的匀浆于12000～20000r/min的转速离心10～20min，取上清液，即为卵提取液；三、血清的制备：将20～30mL新鲜的鲟科鱼类尾椎静脉血或尾椎动脉血室温放置20～40min后，于0～4℃低温保存20～25h，然后于2000～4000r/min离心20～30min，抽取血清，保存备用；四、体液的制备：将步骤一取出的卵子经筛网过滤后，采集卵腔液15mL/尾，于液氮罐内保存：五、测定卵母细胞的极化指数；六、测定鲟科鱼类血清卵黄蛋白原浓度；七、根据卵提取液测定鲟科鱼类卵Fe离子的含量、卵Zn离子的含量、卵VE的含量和卵谷草转氨酶的含量；八、根据体液测定鲟科鱼类体液ACP的含量和AKP的含量；九、选取同时满足从鲟科鱼类体内取出卵子中85％的卵子的卵母细胞的极化指数≥0.07，鲟科鱼类血清卵黄蛋白原浓度≥200μg/mL，卵Fe离子的含量≥170μmol/L，卵Zn离子的含量≥145μmol/L，卵VE的含量≥0.12g/mL，卵谷草转氨酶的含量≥1400U/L，体液ACP的含量≥85U/g和AKP的含量≥39U/g的鲟科鱼类的卵，即完成鲟科鱼类卵子的筛选。