[发明专利]一种机械法分离培养猪精原干细胞的方法无效
申请号: | 201110272928.1 | 申请日: | 2011-09-15 |
公开(公告)号: | CN102311941A | 公开(公告)日: | 2012-01-11 |
发明(设计)人: | 张守全;白银山 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种机械法分离培养猪精原干细胞的方法。本发明所述方法是结合动物睾丸组织的特点,采用机械法分离后将组织块进行培养,丰富了现有精原干细胞的分离纯化方法。本发明所述方法不用通过酶消化就能获得猪精原干细胞,细胞克隆快,状态好,解决了精原干细胞分离难、数量少、培养条件要求高等问题,比起现有的分离技术,本发明方法操作简单,降低了获得细胞的难度,大大降低了实验成本,提高了实验成功率,应该在本领域进行推广。 | ||
搜索关键词: | 一种 机械 分离 培养 猪精原 干细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种机械法分离培养猪精原干细胞的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将仔猪的睾丸放入盛有PBS的容器中,用PBS洗涤2~3次,除去血污;(2)去掉睾丸白膜和结缔组织,将剩下的睾丸组织剪碎,转移到离心管中;(3)加入10倍体积的PBS,用吸管吸打,16 ℃、600 rpm离心5 min,弃上清;(4)重复步骤(3)2~3次,得到猪睾丸曲细精管;(5)将猪睾丸曲细精管接种到事先用0.1 %明胶包被的培养瓶,放入培养箱中进行无菌培养。
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