[发明专利]一种分离胰岛素单体和多聚体的方法无效
申请号: | 201110202209.2 | 申请日: | 2011-07-19 |
公开(公告)号: | CN102276686A | 公开(公告)日: | 2011-12-14 |
发明(设计)人: | 田卫群;胡巧琳 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C07K1/26 | 分类号: | C07K1/26 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 汪俊锋 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明运用梯度电泳分离胰岛素单体和多聚体,其中在胰岛素样品溶液中加入了稳定剂锌和苯酚,使胰岛素、锌和苯酚三者摩尔比为1:(21000~22000):(140~160)。本实验成功地建立了分离胰岛素单体与多聚体梯度电泳检测分析方法,为进一步研究胰岛素与糖尿病及阿尔茨海默症的关系奠定了实验基础,同时为除胰岛素以外的其它蛋白质多聚体的分析研究、蛋白的磷酸化和去磷酸化研究、阿尔茨海默症等蛋白质错误折叠疾病的诊断与防治找出新的药物干预手段等提供了新的思路。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 胰岛素 单体 多聚体 方法 | ||
【主权项】:
一种分离胰岛素单体和多聚体的方法,包括下列步骤:(1)配置磷酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲盐水、Tris‑HCl溶液和NaCl溶液,浓度均为100—500mmol/L,pH均为 4—8;(2)称取4份一定量的胰岛素,分别溶于一定体积步骤(1)得到的四种溶液中,制成胰岛素含量为0.5—2mg/ml的4种样品,分装保存;(3)步骤(2)所得的四种胰岛素溶液中加入一定量的锌和苯酚作为稳定剂,使胰岛素、锌和苯酚三者摩尔比为1:(21000~22000):(140~160);(4)微量注射针上样,进行梯度凝胶电泳,恒压100~200v电泳35min~90min。
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