[发明专利]一种分离胰岛素单体和多聚体的方法

权利要求书

1.一种分离胰岛素单体和多聚体的方法，包括下列步骤:

（1）配置磷酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲盐水、Tris-HCl溶液和NaCl溶液，浓度均为100—500mmol/L，pH均为 4—8；

（2）称取4份一定量的胰岛素，分别溶于一定体积步骤（1）得到的四种溶液中，制成胰岛素含量为0.5—2mg/ml的4种样品，分装保存；

(3)步骤（2）所得的四种胰岛素溶液中加入一定量的锌和苯酚作为稳定剂，使胰岛素、锌和苯酚三者摩尔比为1:（21000～22000）:（140～160）；

（4）微量注射针上样，进行梯度凝胶电泳，恒压100～200v电泳35min～90min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，对4种样品，使用微型混合仪混合15min，37℃水浴10mim，使其充分溶解。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，稳定剂锌和苯酚的配制条件为：分别用去离子水溶解一定量的易溶于水的分析纯锌盐和苯酚，最后定容，使得加入胰岛素溶液前，锌离子的浓度范围为0.25～7.5g/ml，苯酚的浓度范围为1～5mg/ml。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，梯度电泳使用质量体积浓度2%～20%的聚丙烯酰胺梯度凝胶，冷却电泳槽至10℃以下，并预电泳25min～45min。