[发明专利]改良高特异性PCR方法无效
| 申请号： | 201110200385.2 | 申请日： | 2011-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN102876659A | 公开（公告）日： | 2013-01-16 |
| 发明（设计）人： | 李彬 | 申请（专利权）人： | 李彬 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 050091 河北省石家庄*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明属于生物与新医药技术领域，本发明的整体技术构思是：热启动PCR和降落PCR可以在一定程度上提高PCR的特异性，本文将这两种方法结合起来，并在一定程度上进行了改进，最大程度上减少非特异性产物和背景，从而得到一种高特异性的PCR方法。 | ||
| 搜索关键词： | 改良 特异性 pcr 方法 | ||
【主权项】：
高特异性的改良PCR方法如下：(1)将蜡丸同时加入dNTP，MgCl2，引物以及部分10×缓冲液，加热80蜡丸融化，室温冷却，在表面形成一种蜡隔层(2)在蜡隔层上加入DNA Taq酶，DNA模板，以及部分10×缓冲液，进入PCR循环。(3)PCR程序设计：将复性温度初始值设置为70℃，每次下降1℃直至最适退火温度，每个温度循环2‑4次。(4)第三步完成以后，再在变性，复性，延伸，最适程序下进行30个循环左右。(5)最后，72℃后延伸5‑10min。(6)最后在4℃下保存。
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