[发明专利]一种生产降纤酶的工艺方法

摘要

本发明涉及一种生产降纤酶的工艺方法，包括DFAE-sephadex A50平衡，线性梯度洗脱，收集洗脱液三个步骤。本发明的通过蛇毒提取降纤酶的工艺方法相较于原工艺分离时间短、试剂用量小、工艺简单，收率高、质量稳定。

主权项

一种生产降纤酶的工艺方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)DEAE‑sephadex A50平衡方法：取DEAE‑sephadex A50适量，加入新鲜蒸馏水，加热煮沸15min，放至室温，加pH值7.0～7.8，0.05mol/L Tris缓冲液搅拌，放置数小时，弃去上清液，再加入pH值7.0～7.8，0.05mol/L Tris缓冲液，如此反复数次，测pH值＝7.0～7.8；(2)线性洗脱方法：蛇毒均匀加在DEAE‑sephadex A50柱中，第1梯度，在搅拌瓶中加pH值7.0～7.8，0.1mol/LNaCl Tris缓冲液1000ml，以15～20滴/分速度洗脱；第2梯度在搅拌瓶中加pH值7.0～7.8，0.1mol/L NaCl Tris缓冲液1000ml，贮存瓶中加pH值7.0～7.8，0.8mol/LNaCl Tris缓冲液2000ml，以15～20滴/分速度洗脱；共分离出9个峰，将合格峰合峰。