[发明专利]外源因子强化米根霉生物合成富马酸的方法无效
申请号: | 201110190061.5 | 申请日: | 2011-07-07 |
公开(公告)号: | CN102286552A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 闻建平;于守智 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12P7/46 | 分类号: | C12P7/46;C12R1/845 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300072 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及外源因子强化米根霉生物合成富马酸的方法;对飞秒激光诱变获得的米根霉高产富马酸菌株,取斜面孢子用无菌水制成105~108个/mL的孢子悬液;然后取1mL孢子悬液接种到装有50mL种子培养基的250mL摇瓶中,在35℃,180~220rpm摇床中培养28~36h;以10%接种量加入到装有4.5L基础发酵培养基的7.5L NBS发酵罐中;然后:1)发酵0~12小时添加维生素0.6~1.2mg/L VB2;2)在30~40小时添加体积比为1~4%的十六烷;3)在30~40小时添加体积比为0.5~1.5%甲醇;在35℃,通气量控制0.6~1.2vvm,pH5.5~6.5条件下发酵60~80小时;上述步骤1)、2)和3)可以使用其中的任意一步、或任意二步或三步都适用。本法操作简单,成本低廉,使发酵单位比对照提高了7%~28%,产量从34g/L提高到43.5g/L。 | ||
搜索关键词: | 因子 强化 米根霉 生物 合成 富马酸 方法 | ||
【主权项】:
一种外源因子强化米根霉生物合成富马酸的方法,其特征是:对飞秒激光诱变获得的米根霉高产富马酸菌株,取其斜面孢子用无菌水制成105~108个/mL的孢子悬液;然后取1mL孢子悬液接种到装有50mL种子培养基的250mL摇瓶中,在35℃,180~220rpm摇床中培养28~36h;以10%接种量加入到装有4.5L基础发酵培养基的7.5L NBS发酵罐中;然后:1)发酵0~12小时添加维生素0.6~1.2mg/L VB2;2)在30~40小时添加体积比为1~4%的十六烷;3)在30~40小时添加体积比为0.5~1.5%甲醇;在35℃,通气量控制0.6~1.2vvm,pH5.5~6.5条件下发酵60~80小时;上述的步骤1)、2)和3)可以使用其中的任意一步、或任意二步或三步都适用。
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