[发明专利]一种甲胎蛋白的均相时间分辨荧光分析方法

摘要

本发明涉及生物分析化学分析领域，具体涉及一种甲胎蛋白的均相时间分辨荧光分析方法，该方法由以下步骤组成：(a)定量标准曲线制备：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和甲胎蛋白标准品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，得到甲胎蛋白浓度与荧光值的标准曲线；(b)样品检测：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和待测甲胎蛋白样品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，将检测样品得到的荧光值与步骤(a)得到的标准曲线比较计算待测甲胎蛋白样品浓度。本发明所述的方法具有特异性强和检测灵敏度高的优点，在临床分子诊断和食品检测等生物化学分析中具有非常重要的意义。

主权项

一种甲胎蛋白的均相时间分辨荧光分析方法，该方法由以下步骤组成：(a)定量标准曲线制备：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和甲胎蛋白标准品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，得到甲胎蛋白浓度与荧光值的标准曲线；(b)样品检测：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和待测甲胎蛋白样品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，将检测样品得到的荧光值与步骤(a)得到的标准曲线比较计算待测甲胎蛋白样品浓度；其中，所述的HFRFA能量受体由以下方法制备得到：(I)将水溶性量子点、物质的量为水溶性量子点0.02倍的三辛基膦和CPs纳米乳胶球加入热溶胀剂中，用0.1MNaOH调整溶液pH为9，其中水溶性量子点浓度为0.25μM，CPs纳米乳胶球浓度为2mg/mL；在105度下反应30min，冷却到室温，离心沉淀分离得到量子点纳米乳胶球；所述的热溶胀剂由苯甲醇，乙二醇和水组成，三者之间的体积比为苯甲醇∶乙二醇∶水＝1∶1.4∶0.15；(II)将分子量为100kDa的氨基化葡聚糖水溶胶在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐作用下与量子点纳米乳胶球偶联，透析分离，得到量子点纳米水溶胶；(III)在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐作用下将量子点纳米水溶胶与甲胎蛋白抗原的单克隆抗体E010偶联，得到HFRFA能量受体；所述的HFRFA能量供体由以下方法制备得到：将稀土金属铽螯合物与待测抗原的单克隆抗体E014偶联，得到HFRFA能量供体。