[发明专利]一种抗结核病药物高通量筛选模型的构建方法有效
| 申请号： | 201110166552.6 | 申请日： | 2011-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN102839144A | 公开（公告）日： | 2012-12-26 |
| 发明（设计）人： | 岑山;贾平平;张义;李晓宇;周金明;殷霄 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00;C12Q1/66;G01N21/64;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王加岭;张庆敏 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种抗结核病药物高通量筛选模型的构建方法，其是以内源性表达ESX-1分泌系统的海分枝杆菌为模式生物，选择ESX-1分泌系统中C末端带有信号肽的重要的毒力因子CFP-10蛋白与荧光素酶融合，构建外源表达CFP-10和荧光素酶融合蛋白的重组海分枝杆菌，向含有该重组菌的培养液中加入待筛选的药物化合物，培养一定时间后取上清进行荧光素酶活性测定，以此来评价药物对ESX-1分泌系统的抑制活性；同时，通过测定A600来监测海分枝杆菌的生长状况。将此分析方法发展成高通量药物筛选模型，筛选ESX-1分泌系统抑制剂，获得既能降低结核分枝杆菌的致病性又不抑制其体外生长，即不易诱发耐药的新型抗结核活性化合物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 结核病 药物 通量 筛选 模型 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种抗结核病药物高通量筛选模型的构建方法，其特征在于，其是通过构建外源表达来自于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)中的CFP‑10蛋白和报告蛋白的融合蛋白的重组海分枝杆菌，以该重组菌作为针对ESX‑1分泌系统的抗结核病药物高通量筛选模型，向含有该重组菌的培养液中加入待筛选的药物化合物，培养一段时间后离心取上清测定报告蛋白的表达量或活性，以此来评价该药物化合物对ESX‑1分泌系统的抑制活性。
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