[发明专利]一种用于研究模拟微重力效应的三维类骨组织的制备方法

摘要

一种用于研究模拟微重力效应的三维类骨组织的制备方法，涉及一种三维类骨组织的制备方法。本发明是要解决目前研究模拟微重力效应的二维成骨细胞模型不能真实的反应空间骨丢失的过程，不能真实反应在体组织的细胞间生物学特性的问题。方法：一、将PBS缓冲液或生理盐水、海藻酸钠、明胶和羟基磷灰石混合；二、成骨细胞的诱导；三、破骨细胞的诱导；四、制备包裹混合细胞的微球；五、形成三维类骨组织。本发明利用海藻酸钠形成的三维支架，将成骨细胞与破骨细胞共同包埋在海藻酸钠微球之中，三维培养也更好的模拟了生理状态下细胞的生长状况，很好的解决了已有二维成骨细胞模型的不足。应用于空间生物学、航天医学和组织工程研究领域。

主权项

一种用于研究模拟微重力效应的三维类骨组织的制备方法，其特征在于用于研究模拟微重力效应的三维类骨组织的制备方法，按以下步骤进行：一、将明胶放入37℃孵箱内溶解，然后将0.1mol/L的PBS缓冲液或质量浓度为0.85％～0.9％的生理盐水与海藻酸钠、溶解的明胶和羟基磷灰石混合，得到混合溶液，混合溶液中海藻酸钠的质量浓度为1％～5％，明胶的质量浓度为0.5％～5％，羟基磷灰石的质量浓度为0.01％～0.1％；二、成骨细胞的诱导；三、破骨细胞的诱导；四、将诱导后的成骨细胞和破骨细胞与步骤一制得的混合溶液混合，制成细胞密度为1×106～5×106个/mL的混合细胞悬液，采用针头将混合细胞悬液逐滴加入到25～100mmol/L的二价阳性离子溶液中，静置5～10min，得到包裹混合细胞的微球；五、将包裹混合细胞的微球放入质量浓度为0.1％～3％的海藻酸钠溶液中静置5～20min后，然后放入质量浓度为0.5～2％的多聚赖氨酸溶液中静置5～20min，最后放于α‑MEM培养基进行三维培养1～2周，即形成三维类骨组织。