[发明专利]从宣木瓜果实中提取齐墩果酸及制备齐墩果酸标准品的方法

摘要

本发明公开了一种从宣木瓜果实中提取齐墩果酸及制备齐墩果酸标准品的方法。首先将宣木瓜果实洗净，阴干后粉碎成粉状，再用乙醇溶解，超声波助提，得到粗提物，加入水中混溶，再加入正丁醇的饱和水溶液萃取多次，浓缩后得浸膏状物质，溶解后纳滤得到齐墩果酸的样品液，所得的样品液经大孔树脂初步纯化，再经硅胶柱层析，HPLC制备色谱分离精制得到齐墩果酸标准品。本发明方法工艺简单，操作方便，齐墩果酸的收率高，纯度高，可以做成标准品。

主权项

一种制备齐墩果酸标准品的方法，其特征在于：（一）、首先进行齐墩果酸样品液的制备：（1）将经过筛选的宣木瓜果实、清洗、切片、阴干后，在40℃‑60℃下真空干燥，然后再粉碎，过40‑45目筛，得宣木瓜果实粉；（2）将宣木瓜果实粉加入到乙醇溶液中，在30℃‑50℃下，超声波辅助提取30‑50min，经多次提取后，将提取液真空浓缩，得粗提物，并回收溶剂，宣木瓜果实粉与乙醇溶液的重量比为 1：（10‑15），乙醇溶液的浓度为60‑85%；（3）将所得粗提物加水混溶后，再加入等量正丁醇的饱和水溶液萃取多次，收集有机层并真空浓缩，得浸膏状物质，同时回收正丁醇；（4）将步骤（3）所得的浸膏状物质用甲醇溶解，经滤膜过滤，即得齐墩果酸样品液 ；（二）、然后，进行以下步骤：（1）大孔树脂初步纯化处理  将（一）中制得的齐墩果酸样品液浓缩，用95%乙醇溶解，以0.9‑1.1mL/min流速上样，静止3～4h后，先用蒸馏水洗去水溶性杂质,再分别用20%、50%、95%乙醇溶液洗脱，洗脱流速为1.5mL/min，收集95%乙醇洗脱液，回收乙醇，蒸干，即得皂甙粗品；（2）硅胶柱层析  将经大孔树脂层析初步纯化的粗品用甲醇溶解后上柱，并用50%和95%甲醇洗脱，分段收集洗脱液，将95%甲醇洗脱液浓缩蒸干，即得白色针状结晶；（3）将白色针状结晶溶于甲醇中，用HPLC制备色谱分离精制，按制备色谱图出峰时间分管收集洗脱液，将HPLC检测纯度大于95%的流份合并，氮吹去净溶剂，即得齐墩果酸标准品，HPLC检测纯度的流动相V:V为乙腈:水=95: 5；检测波长：210nm；柱温：25℃。