[发明专利]一种生产猪α-干扰素的纯化方法无效
申请号: | 201110082331.0 | 申请日: | 2011-04-01 |
公开(公告)号: | CN102732587A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 王伟颖;闫亮亮;刘桂兰 | 申请(专利权)人: | 瑞普(天津)生物药业有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C07K14/56;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C12R1/84 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300300 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种生产猪α-干扰素的纯化方法,包括发酵、粗提发酵液、阳离子层析柱纯化、硫酸铵纯化、Sephacryl S-200层析柱纯化、Sephadex G-75色谱柱纯化等步骤,其中在层析之前先去热原。本发明方法无需单克隆抗体层析柱,能经济、快速、高效地的纯化获得纯度高于97%的α-干扰素,具有广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 生产 干扰素 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种生产猪α‑干扰素的纯化方法,步骤包括:(1)重组菌株进行发酵;(2)6000rpm,15min离心发酵液取上清,通过微滤除杂、超滤浓缩;(3)用醋酸调节浓缩液pH至5,并过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析),收集0.45mol/L的目标洗脱峰;(4)加入硫酸铵30%(W/V)至稍混浊,6000rpm,10min离心取上清;(5)过Sephacryl S‑200层析柱,通过SDS‑PAGE检测收集目标洗脱峰;(6)过Sephadex G‑75色谱柱,通过SDS‑PAGE检测收集目标洗脱液,置于4℃保存。
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