[发明专利]一种萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养的方法

摘要

一种萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养的方法，其特征在于按以下步骤依次组成：(1)材料准备、(2)播种、(3)杂交、(4)胚胎抢救，采用本发明的方法成功获得萝卜与苤蓝属间杂种胚，并培养出杂种胚幼苗，以利于得到育种新资源。

主权项

一种萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养的方法，其特征在于按以下步骤依次组成：(1)材料准备：以萝卜雄性不育系为母本，以苤蓝为父本；(2)播种：大头菜和苤蓝种子播种在试验大棚里，对其进行常规田间管理；(3)杂交方法：在母本抽薹后开花前进行单株隔离，防止与其他十字花科植株串粉；开花后取父本有粉花朵对母本进行重复授粉，挂牌标记杂交组合、花朵数和授粉时间；授粉后跟踪观察荚的生长发育，并测量杂种荚的长度和横径；(4)胚胎抢救：1)取材：考虑到目的材料的含水量，非雨天在上午10:00以后采荚，雨天一般在下午14:00后取材；2)材料处理：将材料置于烧杯中，加清水将材料清洗片刻，切除果柄备用。在超净工作台上将材料置于小烧杯中，用75％酒精浸泡30秒，再用0.1％的升汞浸泡8分钟，最后用无菌水冲洗3次，每次3分钟；3)接种：将荚果置于灭菌牛皮纸上，剥出胚珠接种于诱导培养基上；。4)培养：接种后的培养基置于温度25℃、光照时间16h.d‑1、光照强度2000～3000lx的培养室中进行培养。30天左右，诱导出胚性愈伤组织。然后将胚性愈伤组织转移到继代培养基上继代培养。大约15天左右，将愈伤组织接种到分化培养基上。待绿芽长到2‑3cm时，转到生根培养基培养；5)炼苗：打开瓶口，在培养室炼苗2‑3天，转到自然条件下炼苗2‑3天；6)移栽：洗去小苗表面的培养基，移栽到小盆里，成活后移栽到大田；