[发明专利]细胞代谢物相对含量作为细胞数量指标进行数据校正的新方法

摘要

本发明公开了“细胞代谢物相对含量作为细胞数量指标进行数据校正的新方法”。其特征在于采用简便的样品前处理方法实现细胞内生化代谢的快速猝灭；通过优化提取溶剂以高效提取细胞内小分子代谢物；再利用基于质谱、核磁共振等测定技术的代谢组学方法全面、半定量测定生物样本中小分子化合物，鉴定出的细胞内标志性代谢物作为细胞数量的定量指标，以此作为权重因子进行数据校正。与现有细胞数量的定量指标相比，该方法简便、快捷、重现性好，减少了额外的实验工作和由此引入的误差，增强了实验结果的准确性和可靠性，解决了体外培养细胞数相对定量的难题，为细胞代谢组学和相关研究提供了一个新的替代方法，可广泛用于细胞分子生物学领域的相关研究。

主权项

一种应用细胞内小分子代谢物作为细胞数目指标用于细胞代谢组学数据的权重，其特征包括以下几个方面：a)采用体外培养细胞样本进行检测；b)采用反复冻融的方法破碎细胞，甲醇沉淀蛋白的方法对细胞中小分子进行提取；c)采用三甲基硅烷基三氟乙酰MSTFA的方法对样本进行衍生化；d)采用气相色谱‑飞行时间质谱(GC/TOF‑MS)进行样本分析；e)采用细胞内肌醇、泛酸、胆固醇、苹果酸对代谢组学数据进行校正。f)采用细胞培养液中肌醇、泛酸对代谢组学数据进行校正。