[发明专利]螺旋藻中β-胡萝卜素的HPLC测定方法

摘要

本发明公开了一种螺旋藻中β-胡萝卜素的测定方法，包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：采用皂化提取法溶解螺旋藻中的β-胡萝卜素(2)标准曲线的制备(3)利用步骤(2)中确定的标准使用液的浓度作为外标计算待测液中β-胡萝卜素的含量。本发明的测定方法对螺旋藻中的β-胡萝卜素分离性好，灵敏度高，选择性和特异性好，能够有效排除基质干扰，且在样品处理过程中采用皂化提取，适用于螺旋藻制品。本发明简化了测定螺旋藻中β-胡萝卜素的实验步骤，降低了因未标定标准储备液及其仪器灵敏度而产生的偶然误差，提高了测定结果的重复性和准确性，并且此检测方法在其他的粉类产品中也可使用。

主权项

1.一种螺旋藻中β-胡萝卜素的HPLC测定方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：采用皂化提取法溶解螺旋藻中的β-胡萝卜素，具体为：称取螺旋藻样品，加入乙醇溶液、抗坏血酸和氢氧化钾溶液于恒温水浴锅中回流，所得溶液转移至分液漏斗用沸程为30-60℃石油醚萃取皂化提取液中的β-胡萝卜素，取上层石油醚层，用水洗涤3-5次，弃去水层，将石油醚层通过无水硫酸钠进行干燥，然后转移至容量瓶定容即得；(2)标准曲线的制备：A、标准储备液：准确称取β-胡萝卜素标准品于容量瓶中，加氯仿溶解，用石油醚定容，配制成胡萝卜素储备液，于-18℃避光保存，临用前标定；标准溶液的标定：取标准储备液，用正己烷定容，混匀，测定其吸光值，以正己烷为空白，入射光波长450nm，平行测定三份，取均值。按下列公式计算溶液浓度：X=AE×100.05]]>X：胡萝卜标准溶液浓度，单位为微克每毫升A：吸光值E：β-胡萝卜素在正己烷溶液中，入射光波长450nm，比色杯厚度1cm，溶液浓度为1ug/ml的吸光系数，为0.2368测定过程中稀释倍数的换算系数B、取胡萝卜素储备液配制不同浓度的β-胡萝卜素溶液，分别上HPLC测定，求得峰面积绘制标准曲线；C、标准使用液：量取现标定的β-胡萝卜素标准储备液配制标准使用液；(3)利用步骤(2)C中确定的标准使用液的浓度作为外标计算待测液中β-胡萝卜素的含量：X=c×Vm×10001000×10]]>按照步骤(1)所述方法制备供试品待测液，X--试样中β-胡萝卜素的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)C-试样测定液中β-胡萝卜素的浓度，单位为微克每毫升(ng/mL)m-试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。