[发明专利]一种重组免疫毒素CCL25-PE38基因及制备方法和应用无效
申请号: | 201110001125.2 | 申请日: | 2011-01-06 |
公开(公告)号: | CN102154355A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 张秋萍;胡义;张莉 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/62;C12N15/85;C07K19/00;A61K38/16;A61K47/48;A61P35/02 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组免疫毒素CCL25-PE38基因及制备方法和应用,其步骤是:A、钓取CCL25的cDNA,通过引物全基因合成CCL25的cDNA;B、钓取PE38的cDNA,运用PCR从pRB391质粒为模板,克隆PE38的cDNA;C、构建Igκ-CCL25-PE38,获得的PCR产物为模板,合成Igκ-CCL25-linker;D、构建pcDNA3.1-CCL25-PE38真核分泌表达载体,分别用核酸内切酶HindⅢ和EcoRⅠ消化PCR扩增产物Igκ-CCL25-PE38和pcDNA3.1载体,构成真核分泌性表达质粒;制备免疫毒素,pcDNA3.1-CCL25-PE38质粒转染293T细胞,采用无血清培养基OPTI-MEM进行培养,纯化,测定蛋白浓度,结果显示:重组免疫毒素CCL25-PE38,重组免疫毒素的质粒在制备治疗或预防急性T淋巴细胞白血病药物中的应用。制备简单,容易纯化。重组免疫毒素CCL25-PE38具有特异性杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤生长效果明显,毒副作用小,有很好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 免疫毒素 ccl25 pe38 基因 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种分离的重组免疫毒素的质粒,其特征在于:重组免疫毒素序列为SEQ ID NO.3所示核苷酸序列。
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