[发明专利]丛枝菌根真菌孢子的表面消毒方法

摘要

本发明公开了一种丛枝菌根真菌孢子的表面消毒方法，其技术方案是将滤纸与吸水纸分别放入几个培养皿内，配制孢子表面消毒液，将载有AMF孢子的滤纸片放入培养皿内的双层滤纸中间，吸取消毒液滴加在上层滤纸上，将双层滤纸转移到装有吸水纸的培养皿中，用吸水纸吸取所吸附的消毒液，取出上层滤纸并倒置放入另一培养皿中，转移滤纸上的AMF孢子，完成表面消毒。本发明通过双层滤纸和培养皿的组合实现了对AMF孢子的表面消毒。该方法操作简单温和，消毒液用量少，消毒前后不会丢失孢子，也不影响孢子的活力，同时也不需要其他仪器的辅助。

主权项

丛枝菌根真菌孢子的表面消毒方法，其特征在于：是通过以下技术方法实现的：1.a.取两张滤纸将其边缘上折后铺入其中一个培养皿内，裁剪一些吸水纸放入其它几个培养皿内，另留二个空培养皿不放滤纸与吸水纸，将培养皿包严，备用蒸馏水，对培养皿和蒸馏水进行高压蒸汽灭菌；1.b.配制含有氯胺T、氯霉素、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素和吐温‑20共5种试剂的孢子表面消毒液，将消毒液通过微孔滤膜过滤除菌；1.c.打开装有双层滤纸的培养皿，将载有AMF孢子的滤纸片放入培养皿内的双层滤纸中间，用胶头滴管吸取消毒液滴加在上层滤纸上，使整个双层滤纸浸透并在上层可见消毒液，将培养皿封盖；1.d.消毒过程中如需更换消毒液，可通过转移双层滤纸至装有吸水纸的培养皿内吸取消毒液，再转至另一套空培养皿中重新添加消毒液；1.e.在消毒完成后，将双层滤纸转移到装有吸水纸的培养皿中，用吸水纸吸取双层滤纸所吸附的消毒液；1.f.转移双层滤纸至装有吸水纸的另一培养皿中，用胶头滴管在上层滤纸中添加无菌水，利用吸水纸吸取水分，重复操作3‑5次；1.g.取出上层滤纸并倒置放入另一培养皿中，解剖镜下分别检查并转移上层滤纸、下层滤纸和滤纸片上的AMF孢子，AMF孢子的表面消毒完成。