[发明专利]人绒毛膜促性腺激素的纯化方法有效
申请号: | 201010566930.5 | 申请日: | 2010-12-01 |
公开(公告)号: | CN102485752A | 公开(公告)日: | 2012-06-06 |
发明(设计)人: | 万龙岩;陈一平;王林鹏;有洪华;汪佩华 | 申请(专利权)人: | 上海丽珠制药有限公司 |
主分类号: | C07K14/59 | 分类号: | C07K14/59;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18 |
代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人: | 郭广迅 |
地址: | 201206 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法,该纯化方法包括以下步骤:(1)将人绒毛膜促性腺激素粗品溶解于pH值为4~5的0.05mol/L醋酸钠缓冲液后,加到载体为琼脂糖、葡聚糖凝胶或羟磷酸钙的羧甲基阳离子交换层析柱上,以pH值为4~5的包含0.05mol/L醋酸钠和0.2~0.5mol/L氯化钠的缓冲液洗脱,收集270~290nm,优选为280nm下光密度为0.6~0.7的洗脱液;(2)将洗脱液脱盐浓缩;(3)再加到羧甲基阳离子交换层析柱,以pH值为5.5~6.5的0.05~0.1mol/L醋酸钠缓冲液洗脱,收集270~290nm,优选为280nm下光密度为0.6~0.7的洗脱液。该纯化方法制得人绒毛膜促性腺激素效价不低于7000iu/mg的HCG产品,总收率超过90%。 | ||
搜索关键词: | 绒毛 促性腺激素 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种人绒毛膜促性腺激素的纯化方法,该纯化方法包括以下步骤:(1)将人绒毛膜促性腺激素粗品溶解于pH值为4~5的0.05mol/L醋酸钠缓冲液后,加到载体为琼脂糖、葡聚糖凝胶或羟磷酸钙的羧甲基阳离子交换层析柱上,以pH值为4~5的包含0.05mol/L醋酸钠和0.2~0.5mol/L氯化钠的缓冲液洗脱,收集270~290nm,优选为280nm下光密度为0.6~0.7的洗脱液;(2)将洗脱液脱盐浓缩;(3)再加到载体为琼脂糖、葡聚糖凝胶或羟磷酸钙的羧甲基阳离子交换层析柱上,以pH值为5.5~6.5的0.05~0.1mol/L醋酸钠缓冲液洗脱,收集270~290nm,优选为280nm下光密度为0.6~0.7的洗脱液。
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