[发明专利]高效液相色谱法分析2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐纯度的方法

摘要

本发明公开了一种分析2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐纯度的方法，采用对氨基苯磺酸作为内标物，以内标标准曲线法对2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐样品的纯度进行了分析，经方法的回收率与精密度试验测试，该分析结果准确可靠。本发明的优点为：色谱柱和检测器采用常见的C18柱和紫外检测器，且色谱条件容易实现，普适性强。该色谱条件下，样品稳定性强，分析结果的重现性好，经方法验证表明该分析方法的准确度和精密度高。

主权项

一种分析2,4,5‑三氨基‑6‑羟基嘧啶硫酸盐纯度的方法，其特征在于：采用对氨基苯磺酸作为内标物，以内标标准曲线法对2,4,5‑三氨基‑6‑羟基嘧啶硫酸盐样品的纯度进行了分析，经方法的回收率与精密度试验测试，其具体步骤为：1）内标液配制：精密称取无水对氨基苯磺酸50mg，置于50mL容量瓶中，以流动相溶解并定容至刻度；2）标样与样品溶液的配制：(1)精密称取硫酸盐标样（95%）50mg，置于50mL容量瓶中，以6mL浓盐酸和流动相溶解并定容至刻度；(2)分别准确移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的上述硫酸盐标准储备液，并以流动相定容至10mL，配制成浓度分别为0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mg/mL的硫酸盐标准溶液，用于标准工作曲线试验；分别准确移取2.5、3.5、4.5mL的上述硫酸盐标准储备液，并以流动相定容至10mL，配制成浓度分别为0.25、0.35、0.45mg/mL的硫酸盐标准溶液，用于精密度与回收率试验；(3)精密称取该硫酸盐样品50mg，置于50mL容量瓶中，以6mL浓盐酸和流动相溶解，并定容至刻度；(4)准确移取3.0mL的上述硫酸盐样品储备液，并以流动相定容至10mL；3）含内标物的混合液的配制：分别移取0.5mL的内标液和0.5mL的上述各浓度的硫酸盐标准溶液或样品溶液，配制成添加了内标物的混合溶液，用于色谱进样使用；4）硫酸盐标样和样品进样：采用20μL定量环在一定的色谱操作条件下对硫酸盐标样和样品分别进样，以内标物与硫酸盐标样的峰面积比（Y=Ai/As）对标样的质量浓度（Ci）作图，绘制标准工作曲线，或者进行回归分析，拟合出线性方程式，从而测定出硫酸盐样品的纯度。