[发明专利]一种利用颠茄外植体诱导胚性细胞的方法

摘要

本发明提供了一种诱导颠茄胚性细胞的方法。涉及包含离体培养系统建立，胚性细胞的诱导、胚性细胞悬浮培养，以及利用胚性细胞获得植株再生。其过程是用颠茄无菌苗长诱导胚性细胞，胚性细胞的扩繁继代，胚性细胞诱导植株再生。该方法诱导获得的胚性细胞可用于生产脱毒苗，也可以利用遗传物质诱导突变产生新的新品系，也可以作为转化受体获得了产莨菪烷类生物碱的颠茄转化子。

主权项

一种利用颠茄外植体诱导胚性细胞的方法，特征在于附加2,4‑D 3.0mg/L的MS固体培养基MSA诱导胚性细胞，胚性细胞在以附加2,4‑D 2.0mg/L的MS固体培养基MSB上筛选、继代培养，其过程包括：（1）在颠茄无菌苗长侧芽诱导胚性细胞，诱导胚性细胞，以附加2,4‑D 3.0mg/L的MS固体培养基MSA诱导胚性细胞；（2）胚性细胞的扩繁继代：将胚性细胞在以附加2,4‑D 2.0mg/L的MS固体培养基MSB上筛选、继代培养，在附加2,4‑D 2.0mg/L、0.2mg/mL 6‑苄氨基嘌呤(6‑BA)、2.2g/L KCl、40g/L蔗糖的MS液体培养基LMS上悬浮培养；（3）胚性细胞诱导植株再生：将胚性细胞在MS培养基上再生完成植株重建。