[发明专利]一种乙型脑炎疫苗的纯化方法有效
| 申请号： | 201010264217.5 | 申请日： | 2010-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN102327608A | 公开（公告）日： | 2012-01-25 |
| 发明（设计）人： | 刘钿莲;沈名锋;艾文 | 申请（专利权）人： | 丽珠集团疫苗工程股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 曹津燕 |
| 地址： | 519045 广东省珠海市金*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种乙型脑炎疫苗的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：将灭活的乙型脑炎病毒浓缩液经聚丙烯葡聚糖分子筛柱层析，洗脱溶剂为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，紫外检测器波长280nm处检测；收集第一洗脱峰，以带有季胺阳离子的醋酸纤维素膜进行离子交换层析膜层析，采用线性洗脱且洗脱溶剂由体积比为缓冲液A∶缓冲液B＝0～100％匀速变化至缓冲液A∶缓冲液B＝100％～0，其中缓冲液A为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，缓冲液B为包含500mM/L氯化钠的pH 7.5～8.0的磷酸缓冲液，洗脱速度为200～600厘米/小时；收集NaCl浓度为70～250mM之间的洗脱液。该纯化方法能够在保护疫苗的免疫原性基础上有效地去除杂质，尤其是对产品安全性有重要影响的DNA，同时缩短了乙型脑炎疫苗的纯化时间，降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脑炎 疫苗 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种乙型脑炎疫苗的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：(1)将灭活的乙型脑炎病毒浓缩液经聚丙烯葡聚糖分子筛柱层析，洗脱溶剂为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，以紫外检测器280nm处检测；(2)收集第一洗脱峰，以带有季铵阳离子的醋酸纤维素膜进行离子交换层析膜层析，采用线性洗脱且洗脱溶剂由体积比为缓冲液A∶缓冲液B＝0～100％匀速变化至缓冲液A∶缓冲液B＝100％～0，其中缓冲液A为pH7.5～8.5的磷酸缓冲液，缓冲液B为包含500mM/L氯化钠的pH 7.5～8.0的磷酸缓冲液，洗脱速度为200～600厘米/小时；(3)收集NaCl浓度为70～250mM之间的洗脱液。
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