[发明专利]一种鸡α干扰素的生产方法及构建的工程菌无效
申请号: | 201010187706.5 | 申请日: | 2010-06-01 |
公开(公告)号: | CN101948890A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 周学章;宋振威;贾芳;王玉炯 | 申请(专利权)人: | 宁夏大学 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C12N1/21;C12N15/63;C12R1/19 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 叶学军 |
地址: | 750021 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | 本发明提供了一种鸡α干扰素的生产方法及其构建的工程菌,其工艺过程为:首先将获得细菌信号肽L-天(门)冬酰胺酶II基因序列插入携带鸡α干扰素成熟蛋白基因序列的pET-28a(+)载体中,得到能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌;再在LB培养液中,37℃,200rpm培养4~8h,加IPTG至终浓度为1mmol/L,37℃,180rpm继续培养2~6h;所得菌液经进一步分离处理得到鸡α干扰素产品。本发明还提供了一种能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌,其分泌表达的过程为:首先通过PCR获得编码鸡α干扰素成熟蛋白和细菌信号肽L-天(门)冬酰胺酶II的基因序列,连接在pET28a(+)的多克隆位点的下游,构建出表达质粒;再将其转化到基因工程大肠杆菌表达细菌中,在常规的培养液中诱导表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 干扰素 生产 方法 构建 工程 | ||
【主权项】:
一种鸡α干扰素的生产方法,其工艺过程为:首先将获得细菌信号肽L‑天(门)冬酰胺酶Ⅱ基因序列插入携带鸡α干扰素成熟蛋白基因序列的pET‑28a(+)载体中,得到能够分泌表达鸡α干扰素的工程菌;再在LB培养液中,37℃,200rpm培养4~8h,加IPTG至终浓度为1mmol/L,37℃,180rpm继续培养2~6h;所得菌液经进一步分离处理得到鸡α干扰素产品。
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