[发明专利]一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法无效
| 申请号： | 201010187625.5 | 申请日： | 2010-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN101899462A | 公开（公告）日： | 2010-12-01 |
| 发明（设计）人： | 李碧春;任丽伟;田智泉;徐琪;常国斌;孙敏;王霄燕;陈国宏 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/85;C12Q1/02;G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法，该方法利用增强型绿色荧光蛋白基因与神经氨酸酶基因构建融合表达载体pcDNA3.0/EGFP-NA，使融合表达载体在NIH-3T3细胞获得表达，然后通过检测融合表达蛋白在细胞水平上的表达位置，建立快速、简捷定位神经氨酸酶的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 重组 神经 氨酸 细胞 定位 方法 | ||
【主权项】：
1.一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法，包括以下步骤：步骤一：将神经氨酸酶基因的cDNA连接进真核表达载体pcDNA3.0，构建pcDNA-NA载体，然后再将增强型绿色荧光蛋白基因连接至pcDNA-NA载体，构建融合表达载体pcDNA3.0/EGFP-NA；步骤二：将融合表达载体pcDNA3.0/EGFP-NA转染NIH-3T3细胞；步骤三：转染细胞培养48h后，荧光倒置显微镜下观察绿色荧光在细胞水平上的表达位置，确定神经氨酸酶在细胞中亚定位分布。
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