[发明专利]化学法-酶法制备1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸的方法

摘要

本发明涉及一种以化学法-酶法相结合的过程来制备1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸(DXP)的方法。该方法以缩水甘油为底物，以无机磷酸盐为磷酸化试剂，水为溶剂，用化学法合成D，L-甘油3-磷酸或L-甘油3-磷酸；再加入过氧化氢酶和L-甘油磷酸氧化酶，丙酮酸钠，二价金属离子，辅羧酶，磷酸三糖异构化酶和1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶及酶保护剂，反应得到含DXP的混合物；再将混合物纯化后得到DXP。本发明中采用D，L-缩水甘油或L-缩水甘油为原料，以磷酸氢二钠为磷酸化试剂，这些商品化试剂的使用解决了以往酶法合成DXP中原料昂贵且不稳定的问题。该方法仅经过一步反应就得到目标分子DXP，制备过程简单、快速；离子交换法纯化后目标分子产率可达60％以上，纯度可达90％以上。

主权项

化学法-酶法制备1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤1)以缩水甘油为底物，以无机磷酸盐为磷酸化试剂，水为溶剂，用化学法合成D，L-甘油3-磷酸或L-甘油3-磷酸；2)向步骤1)的反应产物中加入过氧化氢酶和(L)-甘油磷酸氧化酶，再加入丙酮酸钠，二价金属离子，辅羧酶，磷酸三糖异构化酶和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶及酶保护剂；该反应体系的pH值为7.0-8.0，该反应体系在25～40℃下反应6-14h；反应过程中，色谱法检测反应进行的程度；反应完成后，得到含1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸的混合物；3)纯化：将含1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸的混合物在2-8℃下纯化，其具体实现步骤是：3.1)用阴离子交换剂处理混合物，收集洗脱液，色谱法检测确定1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸洗脱位置；3.2)合并含有1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸的洗脱液，用阳离子交换树脂脱盐，收集酸性洗脱液，减压浓缩洗脱液，得到淡黄色粘稠油状物，即为1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸，置-80℃～-20℃保存。