[发明专利]一种快速检测农药残留的方法

摘要

一种快速检测农药残留的方法，涉及有机磷农药的荧光检测方法。本发明利用带程序的荧光分光光度计，以卟啉化合物为荧光指示剂和显色剂，经制备卟啉溶液和有机磷农药溶液及液态检测溶液，测量液态卟啉检测溶液中有机磷农药。本发明具有检测灵敏度高，检测限低，准确性高，操作简便，便于现场快速检测，经济性好，便于推广应用等特点。本发明可广泛应用于粮食、食品等易含有有机磷农药残留的微痕量检测，也可用于蔬菜、水果等食品安全评估和环境检测中。

主权项

一种快速检测有机磷农药的方法，其特征在于具体步骤如下：(1)卟啉溶液的配制以卟啉，即四苯基卟啉、单羟基四苯基卟啉、四苯基锌卟啉、四苯基五氟锌卟啉、四苯基铕卟啉、四苯基锰卟啉中的1种为荧光指示剂和显色剂，以有机溶剂乙腈为定容剂，按卟啉的质量∶有机溶剂乙腈的体积比为1∶259.0～325.5的比例，分别将卟啉加入有机溶剂乙腈中，搅拌溶解后，就分别制备出6种卟啉质量浓度为0.003～0.004g/L的卟啉溶液，在3～4℃下避光保存；(2)配制已知有机磷农药溶液1)配制农药母液选取市售的有机磷农药，即氧化乐果、敌敌畏、水胺硫磷、毒死蜱，分别加入有机溶剂乙腈中，搅拌均匀，其有机磷农药∶有机溶剂乙腈的体积比为1∶106～1012；2)配制液态卟啉检测溶液第(2)-1)步完成后，按照第(1)步制备出的1种卟啉溶液体积∶第(2)-1)步制备出的1种已知有机磷农药母液的体积比为1∶1～2.5的比例，在第(1)步制备出的1种卟啉溶液中加入第(2)-1)步制备出的1种已知有机磷农药母液，搅拌均匀，直至在第(1)步制备出的6种卟啉溶液中，分别加入完第(2)-1)步制备出的4种已知有机磷农药母液为止，然后对每种液态卟啉检测溶液，用有机溶剂乙腈进行稀释，再分别配制出浓度的梯度从小到大为2x10-7μl/L～0.2μl/L的5个液态卟啉检测溶液，分别静置5～15分钟；(3)检测已知有机磷农药的基本荧光光谱第(2)步完成后，对市购的装载有程序的荧光分光光度计通电预热后，打开荧光分光光度计并设定扫描范围为350nm-700nm、狭缝宽度为5nm、扫描速度为1000nm/min，再根据第(1)步制备出的1种卟啉溶液，即四苯基卟啉、单羟基四苯基卟啉、四苯基锌卟啉、四苯基五氟锌卟啉、四苯基铕卟啉、四苯基锰卟啉溶液中的1种设定相应的激发波长414nm～452nm，然后在荧光分光光度计的检测池中，再将第(2)-2)步制备出的1种相应的液态卟啉检测溶液，按照浓度从低到高的顺序，依次加入，分别进行测量和记录相应的荧光光谱，并通过荧光分光光度计的信号处理系统分别将其基本荧光光谱保存和打印输出，直至测量出第(2)-2)步制备出的120种液态卟啉检测溶液的基本荧光光谱为止，并保存和打印输出；(4)检测待测样品的荧光光谱1)待测样品液的配制第(3)步完成后，按照待测样品的质量∶有机溶剂乙腈的体积比为1∶1～2.5的比例，用有机溶剂乙腈对待测样品即小麦、高粱、玉米、大米进行冲洗，收集冲洗液；2)检测待测样品液的荧光光谱第(4)-1)步完成后，按照第(1)步配制的1种卟啉溶液∶有机溶剂乙腈∶第(4)-1)步制备出的待测样品液的体积比为1∶1～2.5∶1.5～3.0的比例，将卟啉溶液和有机溶剂及待测样品液混合搅拌均匀后，放入荧光分光光度计的检测池中，通过荧光分光光度计的程序测量其荧光光谱，并记录保存及打印；(5)分析判断1)定性判断第(4)步完成后，装载有程序的荧光分光光度计自动将第(4)-2)步测量的荧光光谱与其保存的第(3)步测量出的24种已知有机磷农药的基本光谱逐一进行分析比较并判断：当第(4)-2)测得的荧光光谱与第(3)步测量的某一已知有机磷农药的荧光光谱完全一致时，则待测样品中残留有有机磷农药，且残留的有机磷农药为该已知的有机磷农药；否则，该待测样品中不含有该已知有机磷农药；2)定量分析第(5)-1)步完成后，当待测样品中残留有有机磷农药时，再将第(3)步测得的对应的卟啉-已知有机磷农药的5种不同浓度梯度的荧光光谱的最高峰的荧光强度，作标准导数工作曲线，得到线性回归方程F＝klogC+b，然后将第(4)-2)步测得的待测样品液的荧光光谱的最高峰的荧光强度F代入线性回归方程，就精确确定待测样品中残留的有机磷农药的量C。