[发明专利]海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体

摘要

本发明涉及一种海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体，其特征在于该低温碱性蛋白酶MP晶体为斜状晶体，是胞外酶，分子量49320Da，PI＝8.5，最适催化温度30℃，最适PH9.5，EDTA抑制酶活性，含463个氨基酸；整体结构中主要表现为几个环的位置向蛋白内移动，含有一个锌离子、两个氯离子和八个钙离子的N端结构域和C端结构域，所述N端结构域是蛋白水解结构域，含有结合锌离子活性位点，所述C端结构域是从248至463残基的一个平行β卷结构和七个结合钙离子，结合在平行β卷结构的核心。该蛋白酶MP晶体的酶制剂在洗涤、医药、皮革、纺织、饲料等领域具有广泛应用。

主权项

1.海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体，其特征在于该低温碱性蛋白酶MP晶体为斜状晶体，是胞外酶，分子量49320Da，PI＝8.5，最适催化温度30℃，最适PH9.5，EDTA抑制酶活性，含463个氨基酸；整体结构中主要表现为几个环的位置向蛋白内移动，含有一个锌离子、两个氯离子和八个钙离子的N端结构域和C端结构域，所述N端结构域是蛋白水解结构域，含有结合锌离子活性位点，从20至247残基，其中His169，His173，His179和Tyr209是锌离子的配体，Tyr209和锌离子距离为2.77A，所述C端结构域是从248至463残基的一个平行β卷结构和七个结合钙离子，其中Ca700，Ca701，Ca702，Ca705和Ca706结合在平行β卷结构的核心，Ca704和Ca707的钙离子的所有配基都和氨基酸残基结合，Ca703更靠近溶剂；所述环包括残基21-29，67-70，220-226，405-421，428-432和440-447；晶体结构参数为：空间群    P2₁2₁2₁晶胞参数a＝45.91b＝75.20c＝115.42分子数(a.u)        1Matthews Coefficient1.96数据采集解析度62.99-1.80衍射点数                             28189Completeness(％)                     78.25模型和精修参数总原子数                             3744蛋白(463残基)                        3396水分子                               337金属离子                             9氯离子                               2R_work(％)                            16.98R_free(％)                            21.90Reflections included in R_free set    1472立体化学参数键长键角                                 1.927°氨基酸拉氏图分布分析最适宜区域                           97.35％允许区域                             2.65％。