[发明专利]直接抗人球蛋白试剂卡的制备方法

摘要

本发明涉及一种直接抗人球蛋白试剂卡的制备方法，其特征在于所述试剂卡上具有6个微柱凝胶管，2人份/试剂卡，分别是二管含有抗IgG的凝胶管、二管含有抗C3d的凝胶管和二管含有凝胶悬浮介质的凝胶管，所述方法包括以下工艺过程：凝胶悬浮介质的配制、凝胶的制备、抗体的选择、凝胶的配制和分装。本发明方法制备的直接抗人球蛋白试剂卡灵敏度高，特异性好，质量稳定且一张卡可以同时检测IgG类抗体致敏的红细胞和C3d补体致敏的红细胞，并能准确判断是IgG类抗体还是补体致敏的红细胞。

主权项

一种直接抗人球蛋白试剂卡的制备方法，其特征在于所述试剂卡上具有6个微柱凝胶管，2人份/试剂卡，分别是二管含有抗IgG的凝胶管、二管含有抗C3d的凝胶管和二管含有凝胶悬浮介质的凝胶管，所述方法包括以下工艺过程：步骤一、凝胶悬浮介质的配制所述凝胶悬浮介质配方如下：对羟基苯甲酸甲酯(5.5-6.5)×10-4g/ml对羟基苯甲酸丙酯(1.0-1.5)×10-4g/ml甘氨酸 (1.6-1.9)×10-2g/ml氯化钠 (1.7-1.8)×10-3g/ml磷酸二氢钾 (2.1-2.4)×10-4g/ml磷酸氢二钠 (4.6-4.8)×10-4g/ml牛血清白蛋白 ≤2％，以上试剂用蒸馏水溶解，调pH值为6.6-6.8，步骤二、凝胶的制备选用聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶，颗粒大小为30-60纳米，用步骤一配制的凝胶悬浮介质浸泡后再用该凝胶悬浮介质洗涤3-5次，除去凝胶破损碎片以及聚集的凝胶颗粒，收集得到颗粒大小均匀的、且完整呈球形的凝胶，步骤三、抗体的选择抗IgG试剂的选择：要求按照体积比1∶2和体积比1∶4稀释的抗IgG试剂对按照体积比1∶16稀释的抗D IgG致敏的红细胞有肉眼可见凝集，抗C3d试剂的选择：要求按照体积比1∶2和体积比1∶4稀释的抗C3d试剂对C3d致敏的红细胞有肉眼可见凝集，与抗C3d试剂的反应强度≥1+，步骤四、凝胶的配制将步骤二制备的凝胶与步骤三选择的各抗体试剂按照体积比2∶1～3∶1的比例混合，分别配制成含有抗IgG试剂的凝胶和含有抗C3d试剂的凝胶；将步骤二制备的凝胶与步骤一配制的凝胶悬浮介质按照体积比2∶1～3∶1的比例混合，配制成含有凝胶悬浮介质的凝胶，步骤五、分装按照每管22～28微升的量，将步骤四配制的各凝胶分别加入到一空白卡片的6个微柱管中，形成具有6个微柱凝胶管的直接抗人球蛋白试剂卡。