[发明专利]5'-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用

摘要

本发明公开一种5’-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用，具体制备方法是将核糖核酸粉溶解、酶解，并将酶解液进行超滤纯化并进行阴离子树脂柱交换分离、纳滤、离心得到5’-胞苷；将5’胞苷与20％盐酸反应，以制备成盐酸胞苷，将盐酸胞苷溶于N，N二甲基甲酰胺液中，然后加入等克分子当量的酸氯，于室温条件下搅拌混合液过夜，于真空条件下浓缩混合液呈油状物，与体积比为1∶1的二乙酰乙酯一起研磨生成二乙基酯；然后再与与二乙基酯等当量的碳酸氢钠研磨，收集固体结晶，用水洗涤，干燥重结晶，得到5’-酰化胞苷。

主权项

一种5’-酰化胞苷的制备方法，其特征在于按如下步骤进行：a.将核糖核酸RNA粉置于60℃水中溶解并控制PH值5.0～5.5，完全溶解后，升温至90～95℃，保持1小时后冷却降温至70℃；b.加入RP1酶，保持温度至68～70℃酶解12小时，升温至90～95℃使酶失活；c.酶解液冷却降温至30℃～35℃，将酶解液进行超滤纯化，得到超滤液；d.将超滤液进行阴离子树脂柱交换分离，先用纯水透洗树脂柱，直至流出液紫外吸收值OD260×稀释倍数＜20时，结束水洗；再用0.2M甲酸溶液清洗，当流出液紫外吸收值OD279×稀释倍数≥20且OD280/OD260大于1.7时，开始收集流出液，直至流出液紫外吸收值OD279×稀释倍数＜20，结束收集；e.将收集液调pH值5.0～6.0，通过纳滤浓缩至浓度120g/L，用盐酸调PH值2.0～2.5进行结晶，12小时后，离心得到5’-胞苷；f.将5’胞苷与20％盐酸反应，制备成盐酸胞苷，将盐酸胞苷溶于N，N二甲基甲酰胺液中，然后加入等克分子当量的酸氯，于室温条件下搅拌混合液过夜，于真空条件下、室温浓缩混合液呈油状物，将经浓缩的混合液与二乙酰乙酯1∶1一起研磨生成二乙基酯；然后再与与二乙基酯等当量的碳酸氢钠研磨，收集固体结晶，用水洗涤，干燥重结晶，得到5’-酰化胞苷。