[发明专利]一种山茶未成熟胚再生胚状体的方法无效
| 申请号： | 200910098400.X | 申请日： | 2009-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN101558743A | 公开（公告）日： | 2009-10-21 |
| 发明（设计）人： | 李纪元;范正琪;李辛雷;田敏 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 | 代理人： | 陈继亮 |
| 地址： | 311400浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明主要涉及一种山茶未成熟胚再生胚状体的方法，按以下步骤进行：将种子剥去内外种皮，去除胚根和胚芽，将子叶切成薄片，接种在胚状体诱导培养基上，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d，胚状体诱导培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA；将诱导的子叶形胚状体从母体上分离下来，接种在胚状体生长培养基上，胚状体生长培养基为MS+0.16-BA mg·L-1+0.01NAA mg·L-1+40g·L-1sugar，在苗高1-2厘米时移至1/2MS培养基上。本发明的有益效果是：本发明培养基配方简单，操作工艺简便，培养时间短，再生频率高，成本低，有利于大规模生产山茶及实现外源基因的遗传转化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 山茶 未成熟 再生 胚状体 方法 | ||
【主权项】：
1、一种山茶未成熟胚再生胚状体的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：(1)将山茶花未成熟果子用自来水冲洗干净，再用洗衣粉浸泡10分钟，自来水冲洗；然后转移到无菌超净台上去除果皮后，用体积比为75％乙醇表面消毒30秒，无菌水冲洗2遍，用重量比为0.1％的HgCl2中浸泡15——20分钟，无菌水冲洗5——6遍；(2)将种子剥去内外种皮，去除胚根和胚芽，将子叶切成薄片，接种在胚状体诱导培养基上，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d，胚状体诱导培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA；(3)将诱导的子叶形胚状体从母体上分离下来，接种在胚状体生长培养基上，胚状体生长培养基为MS+0.16-BA mg·L-1+0.01NAA mg·L-1+40g·L-1 sugar，在苗高1-2厘米时移至1/2MS培养基上。
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