[发明专利]一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型有效
申请号: | 200910070794.8 | 申请日: | 2009-10-14 |
公开(公告)号: | CN101671646A | 公开(公告)日: | 2010-03-17 |
发明(设计)人: | 刘方;江筠;王常荣;李宁;陈芝惠;张聃;吕鹏云;曲丽媛;乔文涛 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12Q1/25;C12R1/19 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 | 代理人: | 侯 力 |
地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型。本模型首先利用基因工程技术构建HIV-1整合酶可溶性表达质粒和带有整合酶最适底物LTR序列的质粒,将构建好的重组质粒pET28a-IN转化进入商品化大肠杆菌BL21中得到整合酶表达菌株;然后大规模培养,分离纯化整合酶,作用于底物质粒,加入样品测定活性。此检测模型克服了已有ELISA检测法成本高,本底高,影响因素多等缺点,可在体外大量而快速的对各种天然或化学合成的整合酶抑制剂进行初步筛选,是一种快速,灵敏,干扰因素少,成本低的HIV-1整合酶抑制剂体外筛选模型。 | ||
搜索关键词: | 一种 hiv 整合 表达 菌株 抑制剂 体外 筛选 模型 | ||
【主权项】:
1、一种HIV-1整合酶表达菌株,其特征在于该菌株通过如下步骤构建得到:第1、根据HIV-1整合酶基因序列、需要突变的位点F185K和C280S、以及LTR序列设计引物并由扩增得到目的片段;第2、将第一步得到的目的片段连接到pET28a载体并转化大肠杆菌构建工程菌,即得到HIV-1整合酶表达菌株。
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