[发明专利]合成苏云金素的基因簇

摘要

本发明属于农业微生物基因工程技术领域。具体涉及一种苏云金芽胞杆菌中负责苏云金素合成的基因簇的制备及其应用。所述的基因簇包含thuA，thuB，thuC，thuD，thuE，thuF，thuG，thu1，thu2，thu3，thu4共11个基因，这些基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。其编码苏云金素生物合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2-12所示。本发明所提供的基因及其编码的蛋白质可以用来作为农药杀虫剂库新型核苷类先导化合物，为杀虫剂的开发提供新型靶标；在实际应用中，通过结构改造也将会得到一系列新型高效低毒杀虫剂。

主权项

1、来源于苏云金芽胞杆菌的能够合成苏云金素的基因簇，它包含thuA，thuB，thuC，thuD，thuE，thuF，thuG，thu1，thu2，thu3和thu4共11个基因，它们的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，它们编码的苏云金素生物合成酶的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2-12所示，所述基因在基因簇中的顺序和位置分别是：thuA位于基因簇核苷酸序列的1-363位碱基处，长度为363个碱基对，编码120个氨基酸，编码6-磷酸葡萄糖脱氢酶；thuB位于基因簇核苷酸序列的364-681位碱基处，长度为317个碱基对，编码105个氨基酸，编码解旋酶；thuC位于基因簇核苷酸序列的2617-4344位碱基处；长度为1727个碱基对，编码575个氨基酸，编码磷酸转运酶；thuD位于基因簇核苷酸序列的4661-5278位碱基处，长度为617个碱基对，编码205个氨基酸；编码UDP-葡萄糖脱氢酶；thuE位于基因簇核苷酸序列的7987-8673位碱基处，长度为686个碱基对，编码228个氨基酸，编码莽草酸激酶；thuF位于基因簇核苷酸序列的8670-9797位碱基处，长度为1127个碱基对，编码375个氨基酸，编码糖苷转移酶；thuG位于基因簇核苷酸序列的10957-11637位碱基处，长度为680个碱基对，编码226个氨基酸，编码氨基葡萄糖异构酶；在序列表SEQ ID NO：1中：thu1位于基因簇核苷酸序列的2010-2315位碱基处，长度为305个碱基对，编码101个氨基酸，编码多糖聚合蛋白；thu2位于基因簇核苷酸序列的5790-7475位碱基处，长度为1685个碱基对，编码561个氨基酸，编码非核糖体肽/聚酮合成酶结构域；thu3位于基因簇核苷酸序列的10125-11060位碱基处，长度为935个碱基对，编码311个氨基酸，编码蛋白DUF894thu4位于基因簇核苷酸序列的12015-12446位碱基处，长度为431个碱基对，编码143个氨基酸，编码甲基转移酶。