[发明专利]川牛膝药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明公开了一种川牛膝药材指纹图谱的构建方法，以杯苋甾酮为对照品，将对照品溶液与样品供试溶液在同一色谱条件下进行HPLC检测，进行梯度洗脱，记录色谱图，即得。通过该方法可获得川牛膝药材的标准指纹图谱，完善川牛膝药材的质量评价体系，为川牛膝药材及其饮片质量的全面有效控制提供了理论和实践基础。本发明还公开了根据上述指纹图谱构建方法得到的川牛膝药材的标准指纹图谱。

主权项

1、川牛膝药材指纹图谱的构建方法，包括下述主要步骤：(1)标准品溶液的制备：称取杯苋甾酮标准品，置于容量瓶中，加75％-100％甲醇溶解并定容，使浓度为0.4mg/ml-0.6mg/ml，摇匀，制成标准品溶液；(2)样品供试溶液的制备：取川牛膝药材粉末0.9g-1.1g，加入75％-100％甲醇5ml，振荡均匀，超声提取20min-40min，离心，取上清液以微孔滤膜滤过，滤液作为川牛膝样品供试溶液；(3)HPLC检测：分别吸取上述标准品溶液和样品供试溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录39min内的HPLC图谱；其中，色谱条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；柱温为30℃；检测波长为266nm；流动相为不同浓度的甲醇-水溶液，流速为0.8ml/min；采用非线性梯度洗脱方式，在检测时间内、不同时间段的流动相变化如下：0～5min：甲醇浓度(体积百分比浓度，下同)由5％匀速变至46％，5～32min：甲醇浓度由46％匀速变至66％，32～40min：甲醇浓度由66％匀速变至100％。