[发明专利]一种植物冰结构蛋白的分离纯化方法

摘要

一种植物冰结构蛋白的分离纯化方法，属于食品添加剂分离领域。本发明以冷胁迫植物为原料，经浸取并采用浊点萃取法分离纯化冰结构蛋白，首先采用含非离子表面活性剂的缓冲溶液将冰结构蛋白从植物原料中浸取出来；然后采用非离子表面活性剂形成的胶束溶液进行浊点萃取，加热到浊点温度后分成水相和胶束相两相，疏水性杂质富集于胶束相，而亲水性的冰结构蛋白保留在水相；最后经透析浓缩、冷冻干燥得到白色的冰结构蛋白混合物。采用差示扫描量热法对分离纯化的样品进行了热滞活性检测，证明产品存在较高热滞活性。本发明分离工艺简单，生产成本低，萃取过程无挥发性有机溶剂，纯化效率高，有利于工业生产冰结构蛋白和充分利用植物资源。

主权项

1、一种植物冰结构蛋白的分离纯化方法，其特征在于以冷胁迫植物为原料，经浸取并采用浊点萃取法分离纯化冰结构蛋白，步骤为：(1)制备冰结构蛋白的浸取液：称取经粉碎的冷胁迫植物原料，加入含非离子表面活性剂的缓冲溶液中进行搅拌浸取，浸取1～2小时后过滤，得到固体滤渣和冰结构蛋白的浸取液；(2)浊点分相萃取：继续向步骤(1)得到的冰结构蛋白浸取液中补充非离子表面活性剂，充分混合形成非离子表面活性剂胶束溶液，然后加热到浊点温度进行分相萃取形成胶束相和水相，疏水杂质富集于胶束相，冰结构蛋白保留在水相，离心分出水相，用于透析浓缩；(3)透析浓缩、冷冻干燥：将步骤(2)得到的水相溶液放置于截留分子量为6000～8000Da的透析袋中，进行充分透析，透析后使用聚乙二醇粉末对透析袋覆盖浓缩，浓缩至原水相体积的1/15～1/20时，再进行冷冻干燥，得到经分离纯化的冰结构蛋白样品。