[发明专利]组织工程皮肤培养及增殖活力的检测方法无效
申请号: | 200810305499.1 | 申请日: | 2008-11-12 |
公开(公告)号: | CN101392237A | 公开(公告)日: | 2009-03-25 |
发明(设计)人: | 陆洪光 | 申请(专利权)人: | 陆洪光 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08;A61L27/60;G01N33/53;G01N15/10 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 | 代理人: | 吴无惧 |
地址: | 550004贵州省贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种组织工程皮肤培养及增殖活力的检测方法,它包括以下过程:首先制作含有基底膜成分的三维基质材料作为真皮替代物即人的去表皮真皮组织,培育角质形成细胞;然后将角质形成细胞接种于表面涂有混合组织胶的人的去表皮真皮组织表面,通过空气-液面培养方式进行培养后取样进行皮肤增殖活力检测,继续培养一周后终止培养,将皮肤取出,再行皮肤增殖活力检测。将取下的新鲜培养标本于BrdU培养液中、37℃培养箱中进行孵育,24小时后进行免疫组化染色,在显微下观察增殖细胞,用计算机成像系统计算增殖细胞数量,同时用组织学方法观察组织工程皮肤结构。本发明可量化检测不同培养条件及相关因素对组织工程皮肤细胞增殖的影响。 | ||
搜索关键词: | 组织 工程 皮肤 培养 增殖 活力 检测 方法 | ||
【主权项】:
【权利要求1】一种组织工程皮肤的培养及增殖活力检测方法,其特征在于:它包括以下过程:首先制作含有基底膜成分的三维基质材料作为真皮替代物即人的去表皮真皮组织,培育角质形成细胞;然后将角质形成细胞接种于表面涂有混合组织胶的人的去表皮真皮组织表面,通过空气—液面培养方式进行培养后,用微小活检器取样,进行皮肤增殖活力检测;余皮肤继续培养后再取出进行皮肤增殖活力检测;将取下的新鲜培养标本置于BrdU培养液中、37℃培养箱中孵育,进行免疫组化方法染色,在显微下观察皮肤增殖细胞,并用计算机成像系统计算增殖细胞数量,同时用组织学方法观察组织工程皮肤结构及性状。
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