[发明专利]一种携带木糖代谢相关基因的广宿主质粒及其构建方法无效

专利信息
申请号: 200810246561.4 申请日: 2008-12-25
公开(公告)号: CN101475955A 公开(公告)日: 2009-07-08
发明(设计)人: 李十中;郑焕娣 申请(专利权)人: 清华大学
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/61;C12N15/54;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 北京众合诚成知识产权代理有限公司 代理人: 史双元
地址: 100084北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种携带木糖代谢相关基因的广宿主质粒及其构建方法,属于分子生物学技术领域。该质粒含有4个木糖代谢相关的酶基因,木糖异构酶(xylA)、木酮糖激酶(xylB)、转醛酶(talA)和转酮糖酶(tktA),均来源于E.coli DH5α菌株。该质粒的构建方法是利用Gateway技术,分别设计xylA、xylB、talA和tktA四种目的基因的特异性引物,以E.coliDH5α为目的基因的来源菌株,通过PCR扩增相应基因;PCR产物与其对应的pDONR载体进行BP重组,获得的入门克隆(Entry clones)与pDEST14进行LR重组,得到pDEST14-ABAT质粒;pDEST14-ABAT质粒用Xba I和Nhe I双酶切的产物ABAT与Xha I单酶切的载体pBBR1MCS2进行连接,得到重组质粒pBBR1MCS2-ABAT。转入该质粒的优良菌种可大大降低纤维素乙醇的生产成本。
搜索关键词: 一种 携带 代谢 相关 基因 宿主 质粒 及其 构建 方法
【主权项】:
1、一种携带木糖代谢相关基因的广宿主质粒,包括四个木糖代谢相关基因,其特征在于该质粒的序列如SEQ ID NO:1所示。
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