[发明专利]一种大豆11S球蛋白含量的检测方法无效
申请号: | 200810246198.6 | 申请日: | 2008-12-30 |
公开(公告)号: | CN101482567A | 公开(公告)日: | 2009-07-15 |
发明(设计)人: | 李吕木;韩景华;张邦辉;宋国福 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学;安徽天邦饲料科技有限公司;安徽天邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/53 |
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地址: | 230036安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种测定检测大豆、豆粕及相关产品中11S球蛋白含量的ELISA方法。本发明采用等电点沉淀与凝胶层析纯化大豆11S球蛋白作为抗原,并免疫动物获得抗血清,然后提取抗大豆球蛋白抗体与辣根过氧化物酶连接作为酶标抗体,用作双抗体夹心酶联免疫法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆11S球蛋白的含量。本发明的优越性在于该法检测快速、准确且灵敏度极高。 | ||
搜索关键词: | 一种 大豆 11 球蛋白 含量 检测 方法 | ||
【主权项】:
1、大豆11S球蛋白含量的ELISA检测方法,在于它使用等电沉淀、盐析和凝胶过滤层析纯化大豆11S球蛋白作为抗原免疫动物获得抗体,将其用作双抗体夹心酶联免疫法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆11S球蛋白含量,其具体步骤如下:1)脱脂大豆粉在缓冲液A中提取得到含大豆球蛋白的溶液;2)将溶液pH调至6.4得到沉淀1和上清液;3)将沉淀1溶解在缓冲液B中,并加固体硫酸铵制得51-66%硫酸铵沉淀组分,过凝胶过滤柱,得到纯化的大豆11S球蛋白;4)用大豆11球蛋白免疫动物,获得抗血清;5)盐析和凝胶过滤层析,检测抗体效价;6)将纯化抗体与辣根过氧化物酶连接作为酶标抗体;7)用双抗体夹心酶联免疫法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白含量。
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