[发明专利]一种三聚氰胺人工抗原的合成方法

摘要

一种三聚氰胺人工抗原的合成方法，属于生物化工技术领域。本发明以三聚氰胺为半抗原，利用其结构中原有的氨基，通过戊二醛使半抗原和牛血清蛋白发生结合，制备三聚氰胺的人工抗原，即三聚氰胺-牛血清蛋白；所制备的产品可用于食品中三聚氰胺含量及免疫检测上，具有检测快速、操作简便、成本低的优点，合成步骤简洁，有效，完全可用于免疫分析中，为以后人们的研究提供了必需的人工抗原，可以满足国内对其研究的需要。

主权项

1、一种三聚氰胺人工抗原的合成方法，其特征是以三聚氰胺为半抗原，利用其结构中原有的氨基，通过戊二醛使半抗原和牛血清蛋白发生结合，制备三聚氰胺的人工抗原，即三聚氰胺-牛血清蛋白；合成步骤为：(1)制备A液：称取13mg的半抗原于25mL烧杯中，加入含质量浓度50％甲醛的pH7.2的磷酸盐缓冲液4mL，在室温磁力搅拌下至充分溶解后，逐滴加入质量浓度25％的戊二醛12mL，在室温磁力搅拌下反应3h，此液为A液；(2)制备B液：称取10mg的牛血清蛋白溶于pH 9.6、0.05mmol/L的碳酸盐缓冲液2mL中，低温保存，此液为B液；(3)在室温磁力搅拌下，将B液缓慢滴加到A液中，并在搅拌条件下继续反应3h，期间分两次共加入2mL的磷酸盐缓冲液，即得到人工抗原混合液；(4)将人工抗原混合液移入透析袋中，用0.01mol/L、pH 7.2的磷酸盐缓冲液透析3-4天，每天更换2次磷酸盐缓冲液；最后使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末，即得到人工抗原：三聚氰胺-牛血清蛋白；(5)三聚氰胺人工抗原的鉴定：采用紫外分光光度法测定偶联比。