[发明专利]兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗的制法

摘要

本发明提供一种制备兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗的方法，该方法包括以下步骤：首先将兔病毒性出血症毒株CD85-2毒株接种于家兔，无菌采集24-96小时内死亡家兔的心、肝、脾、肺或肾，并剔除其上的结缔组织；再将其捣碎、过滤后配成乳剂，并对该乳剂进行灭活；将兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17菌株进行复活，再将复活后的菌株进行增殖培养，将培养得到的含有A型多杀性巴氏杆菌菌株的C51-17菌液进行灭活；将灭活后的菌液与佐剂进行混合并浓缩，得到含有A型多杀性巴氏杆菌C51-17的菌液，再将其与灭活乳剂混合，得到所述的二联灭活疫苗。本发明方法获得的二联灭活疫苗具有安全性好、免疫效力高、保存期长的优点。

主权项

一种制备兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗的方法，该方法包括以下步骤：a.首先将兔病毒性出血症毒株CD85-2接种于家兔，采集接种后24-96小时以内死亡家兔的心、肝、脾、肺或肾，并剔除心、肝、脾、肺或肾上的结缔组织；b.将剔除结缔组织的死亡家兔的心、肝、脾、肺或肾捣碎、过滤后配成乳剂，并对该乳剂进行灭活；c.将兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17菌株进行复活，再将复活后的菌株进行增殖培养，将培养得到的含有兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17菌液进行灭活；d.将步骤c得到的灭活后的菌液与佐剂进行混合，静止，得到含有兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17的菌液；e.将步骤b得到的灭活乳剂和步骤d得到的含有兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17的菌液混合，得到兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗，优选地，在所述的步骤d和步骤e之间还包括以下步骤：将所述的含有兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17的菌液进行浓缩，使得该菌液中兔源荚膜A群多杀性巴氏杆菌C51-17的浓度为浓缩前的1.5倍。