[发明专利]线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建无效
申请号: | 200810202245.7 | 申请日: | 2008-11-05 |
公开(公告)号: | CN101502248A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | 周宇荀;戴春花;管清华;周玉梅;肖君华 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;C12Q1/68 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
地址: | 201620上海市松*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建,包括:(1)回交取C3H和B6两种品系的小鼠,以C3H做母本,B6做父本杂交得F1代;将F1代母鼠与B6雄鼠杂交得C3B61,为回交一代;以此轮回杂交十代,得到回交十代的小鼠C3B610;(2)鉴定回交(a)通过Blast两品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,本实验通过扩增线粒体片段再对片段进行测序,鉴定回交小鼠的线粒体DNA;(b)从小鼠全基因组中随机选取40个STR位点,对40个STR位点进行引物设计,鉴定回交小鼠的基因组DNA。本发明用于研究小鼠性发育启动的影响。 | ||
搜索关键词: | 线粒体 替代 实验 小鼠 品系 c57bl mit sup c3h hej 构建 | ||
【主权项】:
1. 线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建,包括:(1)回交取C3H和B6两种品系的小鼠,以C3H做母本,B6做父本杂交得F1代;将F1代母鼠与B6雄鼠杂交得C3B61,为回交一代;以此轮回杂交十代,得到回交十代的小鼠C3B610;(2)鉴定回交(a)通过Blast两品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,以C3H,回交和B6小鼠DNA为模板,进行PCR扩增,再对片段进行测序,鉴定回交小鼠的线粒体DNA,其中上游引物5’→3’ATTCCTTATTGTTTGCCTACT下游引物5’→3’ATATTAGGTGAGAGCGAAAT(b)从小鼠全基因组中随机选取40个STR位点,STR位点在C3H/HeJ和C57BL/6J两个品系中的片断长度互不相同,并相差2个bp以上,且在每条染色体上分布平均,约15~20cM,对40个STR位点进行引物设计,鉴定回交小鼠的基因组DNA。
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