[发明专利]线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建无效

专利信息
申请号: 200810202245.7 申请日: 2008-11-05
公开(公告)号: CN101502248A 公开(公告)日: 2009-08-12
发明(设计)人: 周宇荀;戴春花;管清华;周玉梅;肖君华 申请(专利权)人: 东华大学
主分类号: A01K67/02 分类号: A01K67/02;C12Q1/68
代理公司: 上海泰能知识产权代理事务所 代理人: 黄志达;谢文凯
地址: 201620上海市松*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建,包括:(1)回交取C3H和B6两种品系的小鼠,以C3H做母本,B6做父本杂交得F1代;将F1代母鼠与B6雄鼠杂交得C3B61,为回交一代;以此轮回杂交十代,得到回交十代的小鼠C3B610;(2)鉴定回交(a)通过Blast两品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,本实验通过扩增线粒体片段再对片段进行测序,鉴定回交小鼠的线粒体DNA;(b)从小鼠全基因组中随机选取40个STR位点,对40个STR位点进行引物设计,鉴定回交小鼠的基因组DNA。本发明用于研究小鼠性发育启动的影响。
搜索关键词: 线粒体 替代 实验 小鼠 品系 c57bl mit sup c3h hej 构建
【主权项】:
1. 线粒体替代实验小鼠品系C57BL/6J-MitC3H/HeJ的构建,包括:(1)回交取C3H和B6两种品系的小鼠,以C3H做母本,B6做父本杂交得F1代;将F1代母鼠与B6雄鼠杂交得C3B61,为回交一代;以此轮回杂交十代,得到回交十代的小鼠C3B610;(2)鉴定回交(a)通过Blast两品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,以C3H,回交和B6小鼠DNA为模板,进行PCR扩增,再对片段进行测序,鉴定回交小鼠的线粒体DNA,其中上游引物5’→3’ATTCCTTATTGTTTGCCTACT下游引物5’→3’ATATTAGGTGAGAGCGAAAT(b)从小鼠全基因组中随机选取40个STR位点,STR位点在C3H/HeJ和C57BL/6J两个品系中的片断长度互不相同,并相差2个bp以上,且在每条染色体上分布平均,约15~20cM,对40个STR位点进行引物设计,鉴定回交小鼠的基因组DNA。
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